桔梗多糖de分离纯化与含量测定.pdfVIP

中国麈亏c墨攉 2011,27(17)：83—86 ChineseAgriculturalScienceBulletin 桔梗多糖的分离纯化与含量测定 贾 林，陆金健，卢德赵，施佳杰，周文雅，沃兴德 (浙江中医药大学生命科学学院，杭州310053) 摘 要：利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗 多糖，并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋 白质 含量测定。桔梗饮 片经热水浸提 、乙醇分步沉淀得桔梗粗 多糖PPS80，Sevage法脱蛋 白后 ，通过 DEAE．SepharoseFF离子交换和SephadexG．75凝胶柱层析进行纯化鉴定。分别采用苯酚．硫酸法和考 马斯亮蓝染色法测定纯化后各组分的糖和蛋白质含量。试验结果表明，从桔梗粗多糖PPS80中分离得 到 2个均一性组分PPS80．I和PPS80一II，糖含量分别为90．32％和 86．75％，蛋 白质含量分别为0．48％和 1．96％。该试验首次采用DEAE．SepharoseFF离子交换柱层析结合SephadexG一75凝胶柱层析有效分离 纯化出桔梗多糖均一性组分，为桔梗多糖的进一步研究提供基础 。 关键词：多糖；离子交换柱层析；凝胶层析；DEAE—SepharoseFF；SephadexG一75 中图分类号 ：06．332，Q538，$132 文献标志码 ：A 论文编号： PurificationandContentDeterminationofthePolysaccharidesfrom Platycodongranditlorum JiaLin，LuJinjian，LuDezhao，ShiJiajie，ZhouWenya，WoXingde (CollegeofLifeSciences，ZhejiangChineseMedicalUniversity，Hangzhou310053) Abstract：Topurifythepolysaccharidefrom Platyeodongranditlorum viaion—e‘xchangechromatographyand detectthecontentsofsaecharideand protein，thecrudepolysaccharidenamedPPS80wasextractedrfom Platycodongranditlorum usinghotwater-ethanolrfactionalprecipitation．AfterremovingtheproteinbySevage method， the polysaccharide was purified and identified with DEAE-Sepharose FF ion—exchange chromatographyandSephadexG-75gelchromatography，respectively．Thecontentsofsaccharideandprotein weredeterminedbyphenol—sulfateacidmethodandCoomassiebrilliantbluestainingassay，respectively．The resultsshowedthattwohomogeneousconstituentswereisolatedfrom PPS80namedasPPS80一IandPPS80一II． ItwasdeterminedthatPPS80-Icontained90．32％ saccharidesand0．48％proteins，whilePPS80一IIcontained 86．75％ saccharldesand1．96％ proteins，respectively．Twohomogeneousconstituentsofpolysaccharideswere efficiently purified from the crude polysaccharide PPS80 via DEAE——Sepharose FF ion——exchange ch