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动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 1、为什么细胞培养要分散成单个细胞培养? 细胞所需的营养容易供应,代谢废物容易排除; 2、动物细胞生长特性: 细胞贴壁: 动物细胞的培养过程 1有关概念: 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 体外细胞生长增殖过程 原代培养期(10代细胞以内) 传代培养期(10代细胞以后) 细胞株:(10~50代细胞) 细胞系:(50代细胞以后,细胞发生了癌变) 2、动物细胞培养条件: (1) 无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 动物细胞培养条件: (1)无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) (四)动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 二、动物体细胞核移植技术: 将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 1、过程 应用前景 1、加快家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植供体 4、利用生物反应器生产生物蛋白 存在问题 成功率低 存在健康问题 四、单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是这样的组织细胞 ( ) A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强 D 4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于------------------------------( ) A.培养基不同; B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行; C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能; D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培 养成植株。 A 5、在动物细胞培养的有关叙述中,正确的是( ) A.动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D.培养至50代后继续传代的细胞是细胞株 B 6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去,这种传代细胞称之为( ) A.原代培养 B.传代培养 C.细胞株 D.细胞系 D 7、动物细胞培养的正确过程是( ) A.原代培养→传代培养→细胞株→细胞系 B. 原代培养→传代培养→细胞系→细胞株 C.传代培养→细胞系→原代培养→细胞株 D. 原代培养→细胞系→传代培养→细胞株 A 8、下列与动物细胞培养有关的表述中,不正确的是( ) A.培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B.原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C.动物细胞培养一般能够传到40~50代,但其遗传物质发生了改变 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞 C 讨论: 1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。 培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代10代以内的细胞。 2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,想一想,这是为什么? 3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行
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