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实验四血液中葡萄糖的测定,葡萄糖测定,葡萄糖测定试剂盒,葡萄糖测定正常值,葡萄糖含量测定,葡萄糖测定干化学法,葡萄糖含量测定方法,葡萄糖浓度测定,葡萄糖测定偏高,孕妇葡萄糖测定
实验四 血糖的测定---邻甲苯胺法 标准曲线法 实 验 目 的 掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。 掌握标准曲线法在定量分析中的应用 实 验 原 理 本实验采用临床上常用的邻甲苯胺法,利用葡萄糖在热的醋酸溶液中脱水后与邻甲苯胺缩合,生成青色的Schiff碱,对波长630nm的光有特征吸收,可比色定量测定。 由于邻甲苯胺只与醛糖作用而显色,故此种测定法不受血液中其他还原物质的干扰,测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。 原理反应式 实 验 操 作 一、标准曲线的制备(标准品梯度稀释) 取l0ml容量瓶5只,分别编号1,2,3,4,5,依次加入葡萄糖贮存标准液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0(ml),再以饱和苯甲酸溶液稀释至l0ml刻度,混匀。上述溶液l00ml葡萄糖含量分别为50,100,200,300,400(mg)。 二、显 色 比色及结果 以“0”号管为对照,用分光光度计在630nm处比色测定,以各管的吸光度为纵坐标,相应管中葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线。 根据测定管吸光度,通过标准曲线即查得含量。 附:标准样品法定量测定 * * 取7只试管,编号,按下表操作。混匀后,置沸水浴中煮沸15min,取出,在冰水浴中冷却。 邻甲苯胺法测定血糖操作表 蒸馏水 0.1ml __ __ 邻甲苯胺 5ml 5ml 5ml 葡萄糖标准品 __ 0.1ml __ 待检血清 __ __ 0.1ml 试剂 空白管 标准管 检测管 取3只试管,编号,按下表操作。混匀后,置沸水浴中煮沸15min,取出,在冰水浴中冷却。 以空白号管为对照,用分光光度计在630nm处比色测定,记录各管吸光度,数学计算,获得待检血清中血糖含量值。 *
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