针刺逆转胰岛素抵抗血管内皮功能障碍的实验研究--《广州中医药大学》2009年博士论文.docVIP

针刺逆转胰岛素抵抗血管内皮功能障碍的实验研究--《广州中医药大学》2009年博士论文 内皮功能障碍(Endothelium Dysfunction,ED)作为动脉粥样硬化(Artherosclerosis,AS)的始动环节,对疾病的发生发展有重大影响。近年发现胰岛素抵抗(IR)可导致内皮功能障碍,参与动脉粥样硬化的发病。胰岛素抵抗是代谢综合征多种疾病包括萄葡糖耐量异常、2型糖尿病、肥胖、血脂异常和高血压等代谢紊乱的基础,是动脉粥样硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病等多种心脑血管终点事件基础疾病的重要原因。其对血管的影响,最主要的是慢性并发症。目前血管病变的基础研究的热点话题为“血管内皮功能的障碍”是所有血管病变的中心环节。血管内皮功能的损伤是血管病变的起始环节,也是中心环节。目前,保护血管内皮,逆转内皮损害是防治血管病变的中心环节,也是目前现代医学仍无法突破的瓶颈问题。 针灸作为一种自然疗法,因其简、便、验、廉等优势在几千年的中医传统诊疗中起着十分重要的作用,且众多的研究也证实针灸具有良好的调节内分泌代谢的作用,在治疗诸多现代疾病中已逐渐显示出优势。虽然目前针刺治疗胰岛素抵抗等研究工作开展得较少,但针刺对糖尿病、肥胖、脑梗塞等相关疾病的疗效早已得到了国内外同行的公认。 前人的临床及实验研究表明,针刺对胰岛素抵抗具有一定的逆转效应——通过针刺干预可改善动物模型及糖尿病患者的胰岛素抵抗状态,并可防治慢性并发症的产生与发展,降低由于长期高血糖状态引发的血管性慢性并发症的产生。但目前研究对于以上作用的机制并未进行系统并有针对性的研究。 本研究是前人研究的基础上,以高糖、高脂、高盐饮食复制胰岛素抵抗动物实验模型,结合现代检测技术,深入探讨胰岛素抵抗状态下血管内皮功能的变化状况及针刺对内皮功能变化的影响作用。 全文分文献研究、实验研究和小结三大部分进行。 1文献研究 通过对大量关于胰岛素抵抗的文献综合研究,从胰岛素抵抗概念、胰岛素抵抗与相关疾病关系、胰岛素抵抗发生的影响因素以及胰岛素抵抗发生机理及防治等多方面阐述了胰岛素抵抗的最新研究进展,并对中医药防治胰岛素抵抗的研究现状进行了分析,特别对针灸治疗胰岛素抵抗的国内外研究进展进行了评述,提出今后的研究方向,认为针刺不失为改善胰岛素抵抗的有效方法之一,应加强对其作用机理的深入研究和探讨。 2实验研究 2.1方法 (1)实验分组 将60只雄性sD大鼠[体重(200±20)g以普通饲料进行适应性饲养1周,按体质量随机分为5组,每组12只,分别为空白对照组(Blank Group)、模型1组(ModelGroup 1)、模型2组(Model Group 2)、针刺1组(Acupuncture Therapy Group 1,AT1)和针刺2组(Acupuncture Therapy Group 2,AT2)。空白对照组以普通饲料喂养,其它各组均以高脂高糖高盐饲料饲养。从第5周开始至实验结束,每周测1次体重;从第4周开始,每隔1周空白对照组和模型1组大鼠从眼眶静脉窦采血1次,检测FPG、INS,并计算ISI进行对比,确定造模是否成功。第8周造模成功后,空白对照组、模型2组及针刺2组继续以普通饲料喂养4周,其中针刺2组同时给予针刺治疗,1次/d,连续4周;模型1组、针刺1组继续以高脂高糖高盐饲料喂养4周,其中针刺1组同时给予针刺治疗,1次/d,连续4周。 (2)取穴及针刺方法 取穴:穴位选用“脂三针”(手厥阴心包经“内关”、足阳明胃经“足三里”、足太阴脾经“三阴交”)以及足太阳膀胱经“肾俞”穴。其定位参照大鼠的常用针灸穴位:“内关”位于前肢内侧,离腕关节约3mm左右的尺挠骨缝间;“足三里”位于大鼠后肢膝关节外下方当排骨小头下约5mm处;“三阴交”位于大鼠后肢内踝尖直上10mm处;“肾俞”位于大鼠后背第二腰椎下旁开5mm之两旁肋间。 刺法:内关、足三里、三阴交均以30号1寸毫针(华佗牌,苏州医疗用品厂生产),沿皮斜刺8mm,针尖朝向肢体近端,肾俞直刺5mm,在内关、足三里穴,接电针治疗,将针柄分别连接至电针仪的电极上,采用青岛华声仪器厂生产的G6805电针仪,疏密波,频率5～10Hz强度以肌肉轻微抖为度,电压3～5v,时间持续30分钟。每天1次,连续治疗28天。 第12周实验结束后取标本进行相关指标的检测,结合免疫组学、病理、放射免疫检测等现代检测技术观察针刺对胰岛素抵抗大鼠模型、血脂、相关脏器(肝脏、胰腺)的形态学的影响,以及反应IR大鼠模型血管内皮功能的相关指标:血液流变学指标、相关细胞因子(TXB_2、6-Keto-PGF_(1α)、ET、NO)、主动脉VEGF表达的影响等的影响,重点突出针刺对IR大鼠模型血管内皮功能的影响。 2.2结果 2.2.1针刺对IR大鼠模