生物选修三易考知识点背诵(人教版).docVIP

生物选修三易考知识点背诵(人教版).doc

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生物选修三易考知识点背诵 专题1 ? 基因工程 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切→ 拼接→导入→ 表达 结果 产生人类需要的基因产物 特点 打破种的界限,定向改造生物 本质 基因重组 基因工程的概念 按照人们的愿望,进行严格的设计, 通过体外DNA重组和转基因技术, 赋予生物以新的遗传特性,创造 出更符合人们需要的新的生物类 型和生物产品。基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的, 又叫做DNA重组技术。 1.1.基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。300多种微生物分离出4000多种限制酶 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的 两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 (4)限制性内切酶与DNA解旋酶的区别 限制酶 DNA解旋酶 区别 ?割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 ?将DNA两条链的氢键打开形成两条单链 (5)、限制酶的识别序列: 能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列:在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中轴线(如图),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的。当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,产生的是黏性末端。当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 (6)要获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?两个四个 思考:(1)、限制酶存在于原核生物中的作用是什么? 原核生物易受自然界外源DNA的入侵,但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会利用限制酶将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的目的。 (2)、为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA? 通过长期的进化,细菌中含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键。 ②区别:E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4-DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 (1)载体具备的条件: ①携带外源DNA片段的载体能在受体细胞中复制并稳定保存。或者整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制 ②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (3)其它载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 思考: ⑴作为分子运输车——载体,如果没有切割位点将会怎样? ⑵霍乱菌的质粒有多个限制酶切点,你会用它来做分子运输车吗? ⑶假如目的基因导入受体细胞后不能复制,转基因生物能有预想的效果吗? ⑷目的基因有没有进入受体细胞,如何去发现? 标记基因是否表达 真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行人工改造的。 补充:真核生物与原核生物基因结构的 编码区:能转录相应的信使RNA,能编码蛋白质 非编码区:①不能转录为信使RNA,不能编码蛋白质 ②有调控遗传信息表达的核苷酸序列,在该序列中,最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。 启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。 终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。 RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并

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