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L—型钙通道拮抗剂治疗早产机制的研究,钙通道拮抗剂,钙通道拮抗剂的副作用,钙离子通道拮抗剂,钙拮抗剂的降压机制是,钙离子拮抗剂,钙拮抗剂,二氢吡啶类钙拮抗剂,非二氢吡啶类钙拮抗剂,钙拮抗剂有哪些
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上 海 第 二 医 科 大 学 学 报
32 ’ ActaUniversitatisMedicinalisSecondaeShangha
收缩。 目前 ,L一钙拮抗剂心痛定是拮抗剂类药物 中 行细胞鉴定 。
唯一用于保胎的,国外 的大量临床试验证明,该药保 2.激光共聚焦细胞仪动态测钙 。‘:测定前 12h
胎效果优于利托君 ,副作用少 ,目前认为是一种很有 将长满的细胞用胰酶消化,事先将处理好 的玻片置
前途的保胎药。国外利用 PHM1—41细胞系和原代 于6孔板 ,消化的细胞接种于6孔板 的玻片上。12h
培养的人子宫平滑肌细胞对胞浆钙进行 了系列研 后观察 ,细胞贴壁 良好 ,生长密度均匀。细胞分为六
究,发现了胞浆钙震荡 。 目前 国内对子宫平滑肌 组 ,1组 :取一玻片 ,用细胞培养液加 Furo一3一AM
的膜钙通道 ,胞浆钙研究是空 白。我们拟从控制子 荧光探针孵育 40min,饱和钙液洗涤3次 ,饱和钙液
宫收缩 的终环节入手,借助激光共聚焦细胞仪 的强 1ml置于小皿 中。设置 10s扫一个面 ,5~6个切面后
大功能,对心痛定治疗早产的机制进行探讨 ,以期发 加入催产素 101~1,使终浓度为 lO00nmol/L,连续扫描
现新的钙信号阻断剂来有效治疗早产。 90min。取 10~20个细胞进行图像分析处理。2组 :
为 1组的对照组。余均 同前 ,改加催产素为细胞营
材料与方法
养液 。3组 :把第 1组 的饱和钙液改为无钙液 ,余均
同第 1组。4组 :孵育和洗涤均同前 。加入催产素扫
材料
描 1500s时加入心痛定 10wl使终浓度为 10~mol/L,
1.试剂:胶 原酶 、DNA酶 、FBS、DMEM、Furo一3
连续扫描90min。同样取 10~20个细胞进行图像分
一 AM荧光探针 (Sigma)、心痛定 (粉剂)、催产素 (粉
析处理。5组 :为第 4组 的对照组 。将心痛定改为无
剂)、1:100小 鼠抗人 一desmin(DAKO)、辣根过氧化
物酶结合 Ⅱ抗 (DAKOEnvision)、鼠抗人 o【一action 水酒精 ,终浓度仍为 10~mol/L。6组 :孵育和洗涤均
(Sigma)、FITC标记羊抗 鼠Ⅱ抗 (1:100)(Sigma)。 同前 。加入催产素扫描 2800s时加入心痛定 10wl,
2.仪器 :荧光倒置显微镜 (Olympus)、激光共聚 使终浓度 为 lO~mol/L,连 续扫描 90rain。同样 取
焦细胞仪 (德国Zeiss)。 10~20个细胞进行 图像分析处理 。
方法 统计学处理 需 比较 的各组 间的差异分别用
1.原代培养和免疫组化鉴定 :剖宫产时取少许 SAS统计软件包进行团体 £和配对 t检验 。
子宫肌层组织。加入 消化液 (0.2%胶 原酶) ]。
37℃水浴振荡消化约 12~ 16h。加 DMEM制成细胞 结
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