一种用于藻类精确培养的新型光养生物反应器.pdfVIP

易 科 泰 生 态 技 术 有 限 公 司 Ecotech Ecological Techonology Ltd. 一种用于藻类精确培养的新型光养生物反应器 李川 易科泰生态实验室 摘要：使用 FMT150 新型光养生物反应器，根据预设的程序模拟自然光照，恒温精确培养铜绿微囊藻 （Microcystis aeruginosa ），实时监测了其在通入空气、含有0.4% CO2 氮气和 2%CO2 氮气的生长状况。 通过对监测的 pH 、OD680、OD735、Ft 、Fm’、QY 等参数的分析，充分证明了本仪器能够在精确控制培 养条件的同时检测到藻类在数分钟内的生理变化，适用于微藻生物质能源及相关生物技术的研究应用。 关键词：光养生物反应器 铜绿微囊藻 精确培养 CO2 浓度 能源与水资源的可利用性将会是 21 世纪人类可持续发展战略所面临的重要限制因素。同时 CO2 等 温室气体排放引起的全球气候变化也是一个重大的挑战。因此，目前最为紧迫的是发展出一种新技术能 够提供大量的碳中和（carbon-neutral ）能源，又不会污染水源或产生核废料。 虽然现在距离实现这一目标还很遥远，但研究者已经发现一些种类的蓝藻能够在吸收 CO2 的同时释 放氢气（1,2），合成酒精（3 ）等生物燃料和多种有价值的化合物（4,5 ）。同时在更高等的藻类中也发 现了这种能力（6,7,8 ）。而为了将这些藻类用于大规模工业化生产，则必须首先对其进行精确培养并实 时监控其生长状态，研究筛选性状优良的藻种。 本文介绍的新型光养生物反应器是由捷克系统生物学和生态学研究所的 Ladislav Nedbal 博士和 Photon Systems Instruments （PSI ）公司开发的专门用于自养藻类精确培养和监控的仪器（9 ）。这型仪器 可以提供精确可控的培养条件，并通过内置的叶绿素荧光仪和双波长光度计进行实时多参数监测。 仪器结构与功能 这款新型光养生物反应器为 Photon Systems Instruments 公司的 FMT150 光养生物反应器 （图1、2 ）。 微藻悬浮液盛放在一个长方形的培养容器。容积为 1000ml。培养容器的前后面板为高透光性耐热玻璃。 侧面为耐热并且不会渗漏 O2 和 CO2 的生物相容性（biocompatible ）塑料。底部则包含一个热桥便于从主 机中的 Peltier 加热器向微藻悬浮液传输热量。培养容器的顶部可以拆卸，通过上面的两个标准 Luer Lock 接口可以经由一个 U 型管向培养容器底部注入空气，产生的连续的气泡则可以混匀悬浮液。另外还有两 个 Luer 接口用于出气以及取样和添加培养基。传感器接口连接了一个温度 pH 复合电极。本仪器还可以 增加传感器接口加装 O2 、CO2 或 H2 传感器。培养容器可以直接高温消毒灭菌。 当把培养容器放置到主机中后，微藻悬浮液与高能发光二级管（LED ）的距离为 15mm。光强可以 通过主机控制单元或外部计算机控制（图 2 ）。本实验中所用LED 面板为 627nm 橙红光和 455nm 蓝光 LED 交错排列，LED 之间的距离为 10mm。本仪器使用的LED 可以保证在 60 度立体角的光锥中朗伯散 度可以达到 95%的均一性。微藻悬浮液的吸光率和散射光谱（图 1C）表明蓝光首先激发了叶绿素的蓝 光吸收带（Soret band），橙红光则激发藻胆素。因此，切换蓝光和橙红光可以研究藻类光合状态转换（10）。 本实验中使用的 LED 面板可以调控的光强范围为 0-1500µmol m-2 s-1 。本仪器还可以选配最大光强为 -2 -1 3000µmol m s 和其他光质的 LED 面板。实际上，这样高的光强已经远远超出了大部分微藻正常生长 所需的光强，但在研究微藻的光抑制时则可能用到。另外，当培养藻类密度过大时，光线的穿透深度会 由于微藻细胞的吸收和散射而降低。这种现象在所有光养生物反应器中都会出现而且具有物种特异性 （11,12）。 北京市海淀区中关村东路 89 号恒兴大厦 19A Tel.: +86 101572 Fax: +86 10 62536