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Agilent 1290 超高效液相色谱仪标准操作规程
Ⅰ 目 的:制定Agilent 1290超高效液相色谱仪使用操作规程,确保操作人员能正确规范地操作液相色谱仪。
Ⅱ 范 围:适用于Agilent1290超高效液相色谱仪的使用。
Ⅲ 规 程:
1 开机
1.1 打开计算机,进入 Windows画面。
1.2 打开 1290INFINITY HPLC 各模块电源。
1.3 待各模块自检完成后,双击“Instrument 1 Online”图标,化学工作站自动NFINITY HPLC 通讯。
1.4 从“View”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击”视图”菜单中的“样品视图“系统视图”, 使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
1.5 点击泵下面的瓶图标,选择‘瓶填充‘如下图所示,输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积。点击“Ok”。
1.6 从菜单 “视图”中,选中“在线信号”,选中“信号窗口 1”,然后点击“改变…” 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。(如同时检测二个信号,则重复选中“信号窗口 2”)
2 排气
2.1 首先在方法编辑中,泵的参数设置部分,选好需要排空的通道(保证是开的)
2.2 点击仪器状态视图中泵的图标,选择控制,出现如下图
2.3 勾上吹扫,并且输入流速,时间,比例就可以 purge 泵头。排空的时候阀会自动切换,无需人为介入。
2.4 当我们发现泵头里面有气泡出不来的时候,选择预备---开。然后点击确定。此时泵会用很强烈的方式朝外泵液体,并持续 20 次自动停止。
3 编辑数据采集方法
3.1 开始编辑完整方法:
从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…” 项,如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项,点击“确定” ,进入下一画面。
3.2 方法信息:
在“方法注释”中加入方法的信息(如:This is for test!) 。 点击 “确定” , 进入下一画面。
3.3 进样方式选择
根据自动进样器的类型,选择合适的进样方式。
3.4 泵参数设定:
在“流速”处输入流量,如 1.5ml/min,停止时间:10 min。在“溶剂B”处输入 70.0,(A=100-B) ,也可“插入 ”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
3.5 自动进样器参数设定:
选择合适的进样方式, 如图所示,进样体积 1.0ul ,标准进样”----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。 “洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在针座旁边中洗针。
3.6 柱温箱参数设定:
在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如:40度。并选中它,点击“更多信息>>” 键,如图所示,选中“与左侧相同”,使柱温箱的温度左右一致。
3.7 DAD检测器参数设定:
检测波长: 254nm,带宽=4nm, 参比波长=360nm,带宽=100nm;
检测波长:一般选择最大吸收处的波长。样品带宽: 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长:一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域 。 参比带宽: 至少要与样品信号的带宽相等, 许多情况下用100nm作为缺省值。峰宽(响应时间) :其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。狭缝-狭缝窄,光谱分辨率高;宽时,噪音低。同时可以输入采集光谱方式,步长,范围,阈值。选中所用的灯。 可以开启光学单元温度控制;可以设定8通道信号等。
3.8 FLD 检测器参数设定:
色谱条件:
响应时间=4s. 停止时间: 4min。
激发波长:200-700nm,步长为 1nm,或零级。
发射波长: 280-900nm, 步长为 1nm,或零级。
PMT:多数应用适当的设定值为 10,若高浓度样品峰被切平头,则减少 PMT 值。
“峰宽”:大多数应用设为 4s,只有快速分析采用小的设定值。
多波长及光谱(激发) 。 多波长及光谱(发射) 。
同时可以输入范围、步长、采集光谱。
点击“确定”进入下一画面。
3.9 运行时选项表
在“ 运行时选项表 ”中,选中“ 数据采集” ,点击“确定” 。
3.10 保存方法
从“方法”菜单,选中“方法另存为…” ,输入一方法名,如“测试” ,点击“确定。
4 单次样品运行
从“运行控制”菜单中,选择“样品信息”选项,如下图所示,输入操作者名称,如“安装工程师” ;在“数据文件 ”中选择“手动”或“前缀/计数器” 。
点击“确定”,从“系统视图 菜单启动系统。
等仪器准备好,基线平稳,从“运行控制”菜单中选择“运行方法” ,进样。(若无自动样器,则基线平稳后,进样并搬动手动进样阀,启动运行。)
5 面积百
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