Agilent_1200型高效液相色谱仪标准操作规程.docVIP

Approvals批准 Dept. 部门 Occupation 职务 Signature 签名 Date 日期 Draftsman 起草人 TC 技术中心 职员 Verifier 审核人 QD 质量管理部 文件主管 Verifier 审核人 QD 质量管理部 经理 Approved by 批准人 GMO 技术中心 总监 1 目的 建立Agilent 1200高效液相色谱仪。 2 范围 Agilent 1200高效液相色谱仪的与维护。 3 职责 。 44.1 组成 G1322A脱气机、G1311A四元泵、G1329A自动进样器、G1315B可变波长检测器（D）和一套Agilent 1200 CHEMSTATIONS 软件（软件光盘与说明书原件由工程部保存），打印机。 4.2 在线清洗 若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。首先配制好10%异丙醇溶液，经0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。4.3 开机 接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后含四元泵的Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器和多波长检测器。约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。双击桌面上的Instrument 1 Online，计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面。画面如下所示。 4.4 色谱条件的设定information 在method comments 中输入方法的名称及相关描述，参数设置完毕后单击OK。 ● 进入泵参数设置画面，设置泵流速（ml/min），流动相组成，冲洗梯度，停针时间等，参数设置完毕后单击OK。 ● 进入column thermostatted method 编辑状态，选择柱温箱温度，设置完毕单击OK。 ● 进入VWD编辑状态，选择方法中所需波长、峰宽、响应时间等，参数设置好单击OK。 ● 进入signal details 编辑画面，选择下拉菜单中的VWDIA 进行参数设定，点击“DAD”图标，点击“Setup DAD Signals”，在“”下方的空白处输入所需的检测波长 单个样品进行分析 在命令栏“Run control”下，选择“SampleInfo……”或单击快捷操作的“一个小瓶”图标，然后单击样品信息栏内的小瓶，选择“Sample Info……”，即打开了样品信息页面，可输入操作者（Operator Name）、数据存贮通道 Subdirectory 、进样瓶号 Vial 、样品名 Sample Name 等信息，单击“OK”，即完成。 多个样品连续进行分析编辑新序列在命令栏“Sequence”下，选择“New Sequence”；然后再在命令栏“Sequence”下，选择“Sample Parameters”，可输入操作者（Operator Name）、数据存贮通道 Subdirectory 等信息；然后再在命令栏“Sequence”下，选择“Sequence Table”或单击快捷操作的“三个小瓶”图标，单击样品信息栏内的样品盘，选择“Sequence Table”，即进入连续进样序列表的编辑，可输入进样瓶号（Location）、样品名（Sample Name）、方法名（Method Name）、进样次数（Inj/Location）、进样体积（Inj Volume）等信息，单击“OK”，即完成。调用已有序列在命令栏“Sequence”下，单击“Load Sequence” 或直接单击快捷操作的“Load Sequence”图标（左边一文件夹，右边三个小瓶），选定文件名，单击“OK”即可。在对“Sequence Table”改动过后，切记要在“Sample Parameters”中改变保存路径，否则可能会覆盖以前的图谱。指定样品进样在命令栏“Sequence”下，选择“Partial Sequence”，选中要进的样品瓶号，单击“Run Sequence”，单击“Yes”即可。 进样序列的保存在命令栏“Sequence”下，单击“Save Sequence”或单击快捷操作的“Save Current Sequence”图标（左边一软盘，右边三个小瓶）；单击“OK”，即完成。”ready”，单击控制面板上的"on"，再将泵流速慢慢上升至所需流速。此时系统开始按照所设定的方法平衡柱子。 4.4.2.5 HPLC自动进样 在色谱图中可选择"Change"改变所要检测的波长，"Balance"使基线归零，"Adjust"使横纵坐标适应图谱，对于自动进样系统将