结核分支杆菌核酸适配体研究进展.pdfVIP

动物医学进展 。2014，35(12)：122—126 ProgressinVeterinaryM edicine 结核分支杆菌核酸适配体研究进展 杨 倩 ，王全凯 ，宋战昀 ，李敏思。，张 健 ，王振国 (1．吉林农业大学，吉林长春 130118；2．吉林 出入境检验检疫局，吉林长春 130062； 3．甘肃农业大学，甘肃兰州 730070；4．吉林省 中韩动物科学研究院，吉林长春 130600) 摘 要：结核分支杆菌 (MTB)是 引起 多种宿主感染结核病的重要病原菌，由于结核分支杆 菌耐药菌株 的产生，导致结核病在世界范围内呈高发趋势。由于MTB检 出率较低 ，开发一种简单快速的诊断方法迫在 眉睫。指数富集配体系统进化技术 (SELEX)的原理是从随机寡核苷酸文库 中筛选到能特异性结合靶物质 的寡核苷酸配体 (称为适配体)。论文对近几年国内外通过 SELEX技术对结核分支杆菌筛选出的适配体做 一 综述 ，适配体的靶物质分别为分泌蛋 白MPT64，CFP10一ESAT6蛋 白，多磷酸激酶 2(PPK2)以及结核分支 杆菌 (H37Rv株)整个菌体。体外筛选的结核分支杆菌适配体 ，能对 结核病做 出早期诊 断，并能作为 MTB 疫苗的免疫佐剂 ，在临床诊断及药物研 究等方面有很大应用前景。 关键词 ：结核分支杆菌；适配体 ；MPT64蛋 白；CFP10一ESAT6蛋 白；多磷酸激酶 2；H37Rv菌株 中图分类号 ：$855．3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(2014)12—0122—05 结核病是一种人兽共患的慢性传染病 ，是 由结 作用的靶物质 的表位相结合 ，有封阻这类靶分子的 核分支杆菌 (Mycobacterium tuberculosis，MTB)引 功能，从而达到缓解和治疗的 目的。因此，理论上适 起的影响人类健康 的重大疾病 。近年来 ，随着人 口 配体可被用于诊断及治疗 因有害基因的表达而引起 流动、结核病伴发艾滋病及结核分支杆菌耐药菌株 的疾病 ，如细菌感染等 。 的产生，致使结核病在世界范围内又呈高发趋势。 近年来 ，人们利用酶联免疫法与 SELEX技术 全球约有 1／3的人 口是 MTB的携 带者 ，每年有大 相结合 ，筛选针对标志物的适配体 ，用于诊断和鉴别 约 2百万人死于结核病 ，同时每分钟又有 15人被感 结核病 ，其检测敏感性及准确率明显高于传统的涂 染口]。目前 ，由于MTB的检出率较低 ，导致控制结 片方法 ，并可明显提高结核病 的阳性检出率，尤其适 核病成为一大难题 。MTB对哺乳类宿主主要是通 用于菌阴肺结核 (涂片和培养均为阴性结果的肺结 过气溶胶途径致病。因此 ，我们迫切地需要开发一 核)及肺外结核病 (MTB侵染肠道 、扁桃体 、皮肤等 种诊断MTB的简单而又快速的方法。 器官后 ，引起相应的淋 巴结结核 ，不易取得细菌学检 TuerkC等 首次提出指数富集配体系统进化 查标本)的诊断和鉴别 ]。目前 ，国内外研究者 已经 技术 (systematicevolutionofligandsbyexponential 成功筛选到结核分支杆菌适配体，与其相互作用的 enrichment，SELEX)，此后人们对核酸的研究进入 目标靶 物 质分 别为 结 核分 支 杆菌 的分泌 蛋 白64 了新阶段 。利用该技术从特定的随机寡核苷酸库 中 (MPT64)，CFP10一ESAT6蛋 白(短期培养滤液 蛋 筛选出的，能与 目标靶物质特异性相互作用 的寡核 白一10：culturefiltrateprotein一10，CFP-10和早期分 苷酸配体 叫做适配体 (aptamer)。适配体具有体外 泌蛋 白靶 6000蛋 白：earlysecretaryantigenictarget 人工合成 ，不受免疫原性和免疫条件限制 ，变性与复 6kuprotein，ESAT一6)，