肌红蛋白在氧化镍纳米粒子中的固定及新型生物传感器的制备.pdfVIP

第38卷 分析化学(FENⅪHuAxuE)研究报告 第ll期 of 1533～1537 chineseJ叫mal Che“g时 2010年11月 Analytical DoI：lO．3724／鲫．J．10％．加10．01533 肌红蛋白在氧化镍纳米粒子中的固定 及新型生物传感器的制备 宗水珍1 崔荣静1 费蕾1 李巍巍1 鞠烧先砣 1(常熟理t学院化学与材料工程学院，常熟215500) 2(南京大学化学化工学院生命分析化学教育部重点实验室，南京2100l8) 摘要研究了在氧化镍纳米粒子改性石墨电极(GE)上肌红蛋白(Mb)的直接电化学行为。并制备了新型 H：0：传感器。在O．1moL／L磷酸盐缓冲溶液(PBS，pH7．O)中，肌红蛋白有稳定而明确的氧化还原峰，电子 moL／cm2。二甲亚砜 转移速率常数为6．48／s；式量电位为一0．34V(甜·scE)，表面覆盖量8．06×lO“o (DMsO)的存在对加速肌红蛋白分子与电极之间的电子传递起了重要作用。光谱分析表明：固定在 Mb／Ni0／DMs0膜中肌红蛋白能保持其生物活性，对H：0：有电催化活性，电催化响应与H：0：浓度呈线性关 mA cm2 为417 L／mol，呈现出高亲和性。 关键词 氧化镍纳米粒子；生物传感器；过氧化氢；肌红蛋白；电子转移 1 引 言 研究蛋白质和酶的直接电化学和电催化，对于认识生命体内的电子转移机制和酶的催化机理以及 重要生命物质在生命体内的代谢过程有着重要意义‘11。近期研究表明，利用表面活性剂心’3]、溶胶．凝胶 膜‘4’、离子聚合物拍】、纳米材料‘6“13等通过包埋、交联、组装等形式将血红素蛋白质同定在电极表面， 可以实现血红素蛋白质与电极的直接电子传递。随着纳米材料性质研究的深入，蛋白质(酶)分子在纳 31。肌红蛋白(Mb)表现出的生理功能及参与的代谢过程，大多数 米粒子上的固定研究也备受关注№’12’1 涉及电子传递过程，它是研究血红素类蛋白质的直接电化学以及生物传感和电催化的理想模型。氧化 镍(NiO)作为一种功能材料，对其功能开发及应用研究都非常活跃¨引。 本研究以NiO纳米粒子修饰石墨电极表面固定肌红蛋白分子，考察了蛋白质在此电极上的直接电 化学行为，设计选择性、稳定性及重现性均佳，且准确、可靠、方便、灵敏的新型第3代生物传感器。 2 实验方法 2．1仪器与试剂 饱和甘汞电极、石墨电极(中国科学院南京土壤研究所研制)；cHl660c电化学工作站(上海辰华 仪器公司)；Tu一190l双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；扫描电子图像 分析仪(德国Gemini公司)；Vector22丌一IR傅立叶红外光谱(B11lker公司)。 M1882肌红蛋白(Mb，北京舒伯伟化工仪器有限责任公司上海分公司)，其它试剂均为分析纯，水为 二次蒸馏水。 溶液A：2．0 Mb水溶液；溶液B：含4．0Ni0的二甲亚砜(DMS0)悬浮液；溶液C：4．O g／L g／L g／L NiO水溶液。 2010扣3．18收稿；2010J06一ll接受 常熟市科技局项目(No．cs200808)及常熟理工学院毕业设计(论文)团队课题项目资助 ·E—I舶il：hxju@nju．edu．cn 万方数据 1534 分析化学 第38卷 2．2电极制备 氧化镍的制备参见文献[15]。 改性石墨电极(GE)的面积为0．