高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建.pdfVIP

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2015-09-16 发布于湖北
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建.pdf

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建.pdf

第3l卷第1期中国预防兽医学报 V01．31．No．1 ofPreventive Medicine Jan．2009 2009年1月 ChineseJournal Veterinary 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡巨噬细胞的差异转录基因文库构建肖燕·，安同庆·，田志军1，韦天超1，姜一峰1，彭金美1，周艳君1，仇华吉1，童光志1’铲 (1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150001； 2．中国农业科学院上海兽医研究所，上海200232) HuN4株感染后48h的PAM细胞mRNA 内转录发生差异的基因，本研究采用抑制性消减杂交技术，以HP—PRRSV HuN4株感染后PAM 为实验方(Tester)。以未感染的PAM细胞为驱动方(Driver)进行消减杂交，得到了肿一PRRSV 内转录后发生上调的基因。反之，实验方与驱动方互换进行消减杂交，得到了HP—PRRSVHuN4株感染后PAM 内转录后发生下调的基因。将2种杂交所得的差异转录基因经PCR扩增后分别克隆到T栽体中并转化大肠杆菌行鉴定，结果表明差异文库中的cDNA具有较好的多样性。本研究为下一步的文库克隆的序列测定与差异基因的功能分析奠定了基础。关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒；抑制性消减杂交；差异基因；eDNA文库中图分类号：$852．651 文献标识码：A ofsubtractionof alveolar Construction libraryporcine infected highlypathogenicporcine macrophagesby and virus respiratorysyndrome reproductive XIAO Yanl，AN Zhi-junl，WEITian—cha01，JIANGYi-fen91， Tong-qin91，TIAN PENG Jin．meil，ZHOU Hua-jil，TONG Yan-junl，QiU Guang—zhil，2’ Research of of VeterinaryInstitute，ChineseAcademyAgriculturalSciences， (1．StateKeyLaboratoryVeterinaryBiotechnology，Harbin Harbin Research of Sciences，Shanghai200232，China) 150001，China；2．ShanghaiVeterinary Institute，ChineseAcademyAgricultural the and relatedtovims subtractive