关于采用含量均匀度均值作为含量测定结果的思考与建议.pdfVIP

中国药品标准 2009年第 10卷第 3期 　　168 D rug Standard s of Ch ina 2009, Vo l10 No3 3 1　培养细胞的选择 液阴性对照 。 不同的狂犬病固定毒对不同细胞基质的敏感性 3 4　规范取样和检测时间 有很大差异 ,因此 ,必须使用疫苗生产用细胞进行病 病毒灭活验证试验是评价病毒灭活工艺的效 毒扩增 。如采用其他更敏感的细胞培养 ,应通过实 果 。因此 ,病毒灭活后应立即取样进行检测 ,检测合 验验证并经国家药品管理部门的批准 。 格后方可进行后续生产工艺 。取样后应尽快进行检 3 2　消除甲醛对细胞生长的影响 测 ,如不能立即进行检测 ,可按欧洲药典的规定 ,应 不同的生产企业可能会使用不同的病毒灭活 放置在 - 70 ℃或以下保存 。生产企业应对供试品 β β 剂 ,如 丙内酯或者甲醛 。 丙内酯在病毒灭活工 的保存条件进行验证 ,确保存放期间病毒活性无明 艺结束后可完全水解 ,不会对细胞生长产生影响;而 显改变 。 甲醛无法降解 ,将影响细胞的正常生长 。因此 ,如果 4　建议 采用甲醛作为病毒灭活剂 ,供试品在接种细胞进行 当前 ,病毒放大检查法作为人用狂犬病疫苗病 病毒扩增培养前 ,必须采用相应的方法去除其中的 毒灭活验证的检查方法 , 已被 W HO 规程 、欧洲药典 甲醛 ,或者将甲醛的浓度降低至不足以对细胞生长 以及国外狂犬病疫苗生产企业普遍采用 。试验初步 产生影响的程度 。尽量采用物理的方法 ,如透析法 。 证明该法灵敏度高 、特异性好 。建议我国应开展相 无论采用何种方法 ,首要考虑的是如何保证病毒活 关验证工作 ,并尽快取代现行版药典三部中直接小 性 。必须通过验证证明 , 甲醛处理前后病毒滴度无 鼠脑内接种法 ,提高检测灵敏度 ,降低因病毒灭活不 明显的改变 。 彻底给人用狂犬病疫苗带来的安全隐患 。同时 ,有 3 3　优先选择荧光抗体检查法 关生产企业应在病毒放大检查法的基础上 ,重新评 尽管 W HO 规程规定 ,供试品接种细胞连续培 价人用狂犬病疫苗的病毒灭活工艺 ,并确定相关工 养 2 1 d后 ,既可采用小鼠脑内接种 ,也可采用荧光 艺参数 ,特别是病毒灭活时间的确定 。应在病毒灭 标记抗体检查细胞培养物 ,但前者需要 14 d 后才 活工艺各时间段取样 ,采用病毒放大检查法对病毒 能观察结果 ,而后者将荧光标记抗体与培养物 37 灭活效果进行检查 ,据此制定病毒灭活曲线 。最终 ℃作用 60 ～90 m in 后即可观察结果 , 大大缩短了 确定的病毒灭活时间应是病毒灭活曲线得出时间的 检测时间 。采用荧光标记 的抗体为单克隆抗体 , 一倍 。 具有极高特异性 , 连续培养过程 中通过更换维持 参考文献 液 ,可清除无感染性的病毒 ,消除了灭活病毒对检 [ 1 ] 　国家药典委员会编 《中国药典 》2005 年版 三部 [ S ] 北 测的干扰 。因此 ,相比较而言 , 荧光抗体检查法更 京 :化工出版社 , 2005 [ 2 ] 　R ecomm endation for Inactivated R ab ies V accine for Hum an U se 加简便 、快捷 、准确 。荧光抗体检查供试品的用量