真鲷脂蛋白脂肪酶基因顺式元件PPRE及在肝脏活体调控作用.pdfVIP

第23卷第4期 热带海洋学报 V01．23。No．4 2 00 OFTROPICALOCEANOGRAPHY 4年7月 JOURNAL 004 July，2 文章编号：1009—5470(2004)03—0049—07 真鲷脂蛋白脂肪酶基因顺式元件PPRE 及在肝脏活体调控作用 梁旭方1，李月琴1，李贵生1，白俊杰2，劳海华2， HiromiOku3。Hiroshi Y．Ogata3 (1．暨南大学生物工程学系，广东广州510632； 2．中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室，广东广州510380； 3．NationalResearchInstituteofAquaculture，Nansei，Mie516—0193，Japan) 摘要：从血液提取总DNA并构建基因组文库，克隆海水鱼真鲷(Pagrosomusmajor)脂蛋白脂 肪酶(LPL)基因5’侧翼区序列，再通过竞争性聚合酶链式反应(PCR)方法，定量研究饲料中添 加不同饱和度脂肪酸对其肝脏LPL基因mRNA表达水平的影响。结果表明，真鲷LPL基因 57侧翼区序列中存在顺式元件过氧化物酶体增殖物反应元件，其序列为TGAAGA—TGAcAT， 与TATA(CATAA)盒序列相隔211bp；与喂饲料对照组比较，添加10％油酸可增加真鲷肝脏 LPL基因表达水平，但差异并不显著(声o．05)。用亚油酸或n-3高不饱和脂肪酸混合物取代 添加油酸的一半(占饲料添加量的5％)后，导致真鲷肝脏LPL基因表达水平升高并出现显著 性变化(声o．05)。对真鲷肝脏LPL基因诱导表达随饲料中的脂肪酸不饱和度增加而增加， 表明在活体条件下脂肪酸对真鲷肝脏LPL基因表达的诱导作用可能与脂肪酸的氧化代谢有 关。n-3高不饱和脂肪酸通过过氧化物酶体增殖物激活受体诱导真鲷肝脏LPL基因表达，使 真鲷食物脂质供应水平与其肝脏脂肪酸氧化代谢强度调控偶联起来，可能是真鲷对高脂食物 (特别是富含n-3高不饱和脂肪酸食物)的一种适应。 荚键词：真鲷(Pagrosomusmajor)；脂蛋白脂肪酶基因；顺式元件；转录调控；高不饱和脂肪酸； 肝脏 中图分类号：$912 文献标识码：A 脂蛋白脂肪酶(1ipoproteinlipase，简称LPL)催化水解血浆脂蛋白中来源于食物的甘 油三酯，并释放出游离脂肪酸以供贮脂器官贮存或诸如肌肉等其它器官氧化，因而在机体 脂质代谢调控上起关键作用[1]。与人等哺乳类动物习惯于利用糖类不同，鱼类优先并大 量使用脂类作为能源，因此是研究脂质代谢的理想实验材料[2’3]。海水鱼真鲷(Pagroso— mus major)肝脏已证实存在LPL基因对喂食高脂食物后的诱导性表达[4]，而人等哺乳类 肝脏LPL基因仅在胚胎期表达，出生后不久其表达即被关闭[5’6]。 过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferato卜activatedreceptor，简称 PPAR)属于核内受体超家族成员，是依赖于配体的转录调控因子。经配体激活后，PPAR element，简 通过被称为过氧化物酶体增殖物反应元件(peroxisomeproliIeratorresponse 收稿日期：2003—08—23；修订日期：2003—12—19 基金项目：广东省自然科学基金项目(980702)；日本STAFellowship基金项目(298157) 作者简介：梁旭方(1965一)，男，湖北省武汉市人，博士，副教授，主要从事鱼类功能基因表达调控研究。E-mail xfliangl@hotmail．corn 万