皮肤化学美白剂抑制酪氨酸酶活性的研究.pdfVIP

维普资讯 弟 1期 2001年2月 ～ 吾 - 与● 皮肤化学美白剂抑制酪氨酸酶活性的研究 刘宇红 董银卵 李才广 (北京工商大学化工学鲩 北京 100037) 摘要：采用化学评价法，即遥过测定皮肤美白剂对酪氨酸酶的活性抑制率，对9类 13种皮肤美白剂的活性进行 了评价与比较。排出了抑制次序；绘制了备美 白剂浓度与其酷氨酸抑制率关系曲线；多数美 白剂呈钟形曲线 ；得到了 备美 白剂的ICmax及 】C∞；探讨了酷氨酸酶抑制率与美 白效果评价的关系。 关麓词：皮肤美 白剂；酪氨酸酶；黑色素；酪氨酸活性抑制率 中图分号：1Q658．2 文献识码A 文章编号：1(]01—1083(2001)0】一0021—03 皮肤化学美 白剂是通过作用于皮肤黑色素的形 1．2 实验方法 成、代谢途径的某个阶段，控制、抑制黑色素生成且 于试管中，按表 1准确吸取第 1，2，3，4组反 符合安全要求的物质。 应液，混匀 ，20℃，3．5h后 ，迅速转移至 3mL比色 皮肤化学美白剂种类很多，其中一大类是通过抑 皿中，于475nm处测吸光度A，每组平行实验 2次． 制酪氨酸酶活性或阻断从酪氨酸生成黑色素的氧化反 按下式计算对酪氨酸酶抑制率： 应，从而减少黑色素的生成而达到美 白皮肤的效果。 抑制率 ％= (1- ) ×10o 因此该类美 白剂对酪氨酸酶活性抑制率 (以下简称酪 氨酸酶抑制率)的高低成为衡量该类物质美 白效果的 式中：Al，A2，A3，A4分别为表 1中 1，2，3， 重要指标l 。近年来 ，国内外相继开发出了此类美 4号反应液于20℃，3．5h时，475nm处 的吸光度。 白剂，但它们对酪氨酸酶抑制率的相互比较 ．以及 表 1 反应液组成 ／mL 它们的浓度与酪氨酸酶抑制的关系等，尚未见文献报 道。 实验中，将酪氨酸酶加人其底物即酪氨酸或多巴 (叉称黑色素前趋物)中，通过测定上述体系中加人 美 白剂及不加美 白剂黑色素中间体 (多巴色素)于 475nm处 的吸光度 ，来评价美 白剂对酪氨酸酶的抑制 对于上述 13个美 白剂样品，每种美 白剂均测定 率l】 J。评价实验中需使用酪氨酸酶，购买酶试剂价 其不同浓度下的抑制率 (所取浓度参考各原料公司推 格较贵，本实验建立了自制酶的评价体系．为常规大 荐的使用浓度)，从而得到浓度 一抑制率关系曲线。 量分析提供可能。 从该曲线上还求得 ICraax(即美 白剂在其最大酪氨酸 1 实验部分 酶抑制率下的浓度)及 (即当抑制率为 50％时 1．1 主要仪器及药品 美 白剂的浓度)。 721分光光度计；分析天平；L一酪氨酸 (Sig． 2 结果与讨论 m)；酪氨酸酶 (自制 ，0．07owmL)；pH6．8磷酸缓 2．1 各美 白剂浓度与其酪氨酸酶抑制率关系 冲液 。 各美 白剂浓度与抑制率关系见表2和图1～图6。 美 白剂 (13个)：熊果苷 1 ，2 ，3 ，4 (分 实验表 明，当反应时问一定时，美白剂浓度与其抑制 别来 自4个厂家)，曲酸，vc，2．磷酸．广【抗坏血酸酯 率曲线为 (准)钟形线 (甘草提取物除外)，即抑制 (以下简称 vc磷酸酯)钠 1 ，2 (分别为进 口及 自 率随浓度 的增加而增大到最大值后 ．随浓度 的增