水性二相系统和逆流色谱对牛膝多糖的纯化的研究.pdfVIP

而道远、持之以恒的事，是各级卫生行政部门、医疗单位、中药收购和炮制单位义不容辞的责任。也是目前 中医药队伍到了虽整顿不可地步，各级参与中医药领导必须足够重视，常抓不懈，认真对待。加强专业人 员培洲，取缔无证行医，实现中医药剂型改革，严把中药收购关，严格执行中药炮制规程，使为医者尽量认 识中药饮片，对药物形态、炮制、质地软硬、气味等进一步了解，使医疗沿着正规轨道健发展，为提中医药社 会效益经济敢益，为解除患者病痛，为确保患者用药安全而共同奋牛。 水性二相系统与逆流色谱 ‘对牛膝多糖的纯化研究 巢志茂 中国中医研究院中药研究所 涩泽庸一 东京药科大学部 水性二相系统是指利用两种聚合物分子之间或高聚合物分子与无机盐分子之间在水中产生的不相溶 性而形成的双相水溶液系统，又叫水溶液两相系统，烈水相系统，双水相聚合物溶剂系统。利用水性二相 系统的分配萃取，可以从细胞匀浆液中直接提取酶和蛋白质，但在时行中药的高分子物质的提取、分离和 纯化方面尚未见报道。 逆流色谱(ccc)是没有固体物质支持的液液分配分离技术，町广泛地用于天然产物的分离和纯化。 高速逆流色谱因在分配效率和分离时间方面具有显著的优势，从七十年代起得到了很快的发展。交叉轴 同步线圈行星离心式(x—axis42FC)为高速逆流色谱的种，其柱架轴垂直离心系统的离心轴。其最新的 设计在于提高了极性溶剂系统的固定相保留能力，曾采用双水相聚合物溶剂系统分离蛋白质，采用乙酸和 磷酸钾缓冲溶液组成的两相溶剂系统分离香豆素及其相关化合物。 由于逆流色谱的基本原理是液液分配，所以在早期的水与有机溶剂或多种有机溶剂组成的两相基础 上，近年发展的水牛二相系统肘逆流色谱的发展起了推动用。 中药牛膝水提取物中的高分子物质对P388自血病细胞且有显著的体外细胞毒性，主要成分为多糖， 并古有蛋白多糖成分。为了获得较高收率的多糖，改变多糖的分离纯化技术，我们采用聚乙二醇和磷酸盐 缓冲溶液组成的水性二相系统，利崩高速逆流色谱技术，对牛膝水提取物的不透析部分进行丁分离研究。 一、仪器和材料 L． 逆流色谥仪为)皿型交叉轴线圈行星离心式(CPC)高速逆流色谱仪(美国NIH仪器商店Jimrnie Slerap先生制作)。其主要特征和性能为：具有一对对称的水平旋转轴，两头的旋转架位于离心轴外10cm 处。卷轴形柱架安放于每个旋转轴上，远离其中心点10cm。两个多层线圈分离柱由26ram内径的聚四 氟乙烯管(美国Raritan的Zeus工业产品)卷绕在152cm直径的架轮毂上，在一对相距5cm间隔的凹缘之 问绕成数层呈逆时针的线圈。每个柱均有4层线圈，170ml容积。安放在旋转架上的一对线圈被连接在 一起，构成34011d的总彝积。通过速度控制器(美国芝加哥BodineElectic制造)调整该仪器的旋转速度为 外吸收采用日本岛津u，一1200分光光度计。、 透析膜为美国sp∞tnnnledical工业公司毕产的SPECURAPOR牌3号管状玻璃纸透析膜。切割分子 量(MWCO)3500，平展宽度54ram，直径341ran，体积长J竖比9 3ml／dan。剪取约25cm长度的透析膜管数 根，以水软化，加热洗涤数次，至投有较重的硫昧后，以蒸馏水清洗，备用。 牛膝为日本东京都议方药店市售的中国产牛膝的生药饮片，经中国中医研究院中药研究所谢宗万研 bidontataBL的干燥根。 究员鉴定，系苋科植物牛膝Achyranthes 聚乙二醇(PEC)1000，磷酸氢二钾，磷酸二氢钾等试剂均为美国SICMA工业公司的产品。 1411 二、实验与结果 1．高分子物质融r提取 牛膝10009，以蒸薪水振摇提取3次，每次24小时，提取浊度23℃。冷冻f燥水提取液，得提取物 6％。聪惟取物1009，分置十透析管中，将透析管两头密封后置于10L烧杯中以梳．动的蒸馏 6169，收率61 水透析。取少量透析液，滴人01IN