IGF-1对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠脑细胞线粒体膜电位的影响.pdf

UniversitatisMedicinalisAnhui2013 ·1001· 安徽医科大学学报Acta Sep；48(9) IGF．1对缺氧缺血性脑损伤新生小鼠脑细胞线粒体膜电位的影响 吴叶娟1，步仰高2，王杨1，黑明燕3，陈志武4，桂丽5，李报5 摘要 目的探讨胰岛素样生长因子一1(IGF一1)对缺氧缺血 是导致新生儿死亡或存活者永久性神经功能损害、 性脑损伤(HIBD)急性期新生小鼠脑细胞线粒体膜电位 智力障碍的主要原因¨J。有研究旧。1显示，胰岛素 (△‰)的影响。方法采用改良Rice方法制备新生小鼠样生长因子．1(insulin-likefactor一1，IGF一1)对 growth HIBD动物模型。7日龄C57／BL新生小鼠91只随机分为正 脑缺氧、脑缺血具有神经保护作用，但多见于成年鼠 常对照组(n=7)、假手术组(n=22)、缺氧缺血组(HI组，n 脑缺血模型及离体实验研究；对新生小鼠HIBD神 =22)、假手术+IGF一1组(n=18)、HI+IGF—I组(n=22)。 经保护作用的研究较少，尤其是有关外源性IGF．1 假手术+IGF．1组、HI+IGF-1组在术后即刻予腹腔注射 能否改善HIBD急性期新生小鼠脑细胞线粒体功能 IGF一1(50斗g／kg)，假手术组、HI组注射等体积生理盐水，各 组于术后0、3、6、12、24、48h取大脑皮质、海马、丘脑，制成单 的相关研究报道较少。该研究旨在探讨IGF一1对 细胞悬液以罗丹明123(Rh0123)标记后使用流式细胞仪测HIBD神经保护作用的可能机制，为IGF．1应用于新 定脑细胞线粒体膜电位。结果①皮质、海马、丘脑分别在 生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic．ischemic encephalopa． 术后3、6、12 h出现肿胀、凋亡，HI后48h神经元肿胀、变性 thy，HIE)的临床治疗提供实验依据。 最明显，具有凋亡特征神经细胞达高峰；②正常对照组、假 手术组、假手术+IGF-1组皮质、海马、丘脑各部位在不同时1材料与方法 点平均荧光强度差异无统计学意义；③IGF一1对大脑皮质损 1．1 实验动物新生7日龄(P7，出生当天记为0 伤修复有两个间期，对丘脑修复延迟且作用时间短；④HI 组脑细胞平均荧光强度的升高最先出现在皮质(术后3h)， 学实验动物中心，雌雄不限，4．5—4．8g，均由体格 其次为海马(术后6h)，最后在丘脑(术后12h)，HI+IGF一1 健壮母鼠带养。 组各部位脑细胞平均荧光强度低于HI组(P0．01)。结论 IGF一1可以减轻HIBD后脑水肿，减少神经细胞凋亡；推测1．2主要试剂与仪器胰岛素样生长因子和牛血清 IGF-I的神经保护作用可能与减轻HIBD急性期新生小鼠各 部位脑细胞线粒体膜电位的降低、改善线粒体功能有关。 备(组织消化)试剂盒、木瓜蛋白酶、罗丹明123 关键词缺氧缺血；脑；线粒体膜电位；胰岛素样生长因子一 1；小鼠 中图分类号R722．12 clone公司。 文献标志码A文章编号1000—1492(2013)09—1001—05 1．3实验动物分组与模型制备91只