乳源降血压七肽基因在毕赤酵母中的表达研究.pdf

第42卷第8期 东北农业大学学报 42(8)：48—55 2011年8月 JournalofNortheast 2011 Agrlcuhural August University 乳源降血压七肽基因在毕赤酵母中的表达研究 韩建春1，李名远1，李杰2 (I．东北农业大学食品学院，哈尔滚150030：,2．东北农业大学生命科学学院，哈尔滨150030) 摘要：利用基因工程技术在毕赤酵母中高效表达乳源抗高血压七肽，为大规模生产抗高血压肤奠定基础。 根据毕赤酵母密码子偏爱性。人工合成了具有较高活性的抗高血压七肽串联基因序列。将串联基因克隆至表达载 体pPIC9上，并转化毕赤酵母GSll5，经PCR检测获得2株重组菌株。重组茵经甲醇诱导，表达的分泌蛋白经胰 蛋白酶酶解，测定酶解产物抑制ACE酶活性。结果表明，表达蛋白的胰蛋白酶酶解产物抑制ACE酶活性达到 65．12％。IC∞值为0．0203 mg·mL-1。研究成功合成了串联的13拷贝抗血压七肽基因。并实现了其在毕赤酵母中的 高效表达。表达蛋白的胰蛋白酶酶解产物具有抗高血压肤活性。 关键词：抗高血压肤；基因克隆；毕赤酵母；表达 中图分类号：TS252．59 文献标志码：A 文章编号：1005-9369(2011)08-0048-08 seven tandem Dairy-derivedanti—hypertensiOnpeptide genesynthesis and inPichia Jianchunl，LIMingyuanl．LIJie2(1．Food expression pastoriS／HAN 1 ofLife Sciences， College。NortheastAgriculturalUniversity。Harbin50030。China；2．College Northeast 1 University，Harbin50030，China) Agricultural researchused inPichia milk Abstract：This in genetic technology express engineering efficiently for 90u陀e mass seven the peptides antihypertensivepeptides antihypertensive production。and lay tothePichiaanticodon with foundaUon．According