PER1及RACK1蛋白作用位点分析.pdfVIP

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2015-09-20 发布于安徽
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PER1及RACK1蛋白作用位点分析.pdf

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●-…’ ●… 7 四川大学学报(医S学ciSichuanUniv(MedScE版d)Edi) 蛋白作用位点分析* PERl与RACKl 鲁芳1，胡丽娟2，刘德松3，汪宇辉2，刘彦友2，甘露2，薛建新2，万朝敏4，王正荣2△ 1．四川省医学科学院·四川省人民医院(成都610072)；8．四川大学华西基础医学与法医学院生物医学工程研究室； 3．四川大学华西基础医学与法医学院形态学实验室；4．四川大学华西妇产儿童医院儿科【摘要】目的共转染酵母AHl09进行杂交，通过营养缺陷筛选、报告基因检测获得阳性克隆，并采用体外转录、免疫共沉淀实验证实阳性克隆蛋白间的相互作用。结果酵母双杂交筛选得到人SCN区域内表达RACKl蛋白的克隆，重组 PERl结合的最小区域位于V、Ⅵ、Ⅶ三个WD40结构域，提示其碳端序列为其结合的关键部位。【关键词】近日节律PERIODl蛋白相互作用RACKl酵母双杂交WD40结构域【中图分类号】R781 IdentificationofRACKI-PERIProteinInteractionSitesLU Yu—hui， De-song，WANG Fang，HULi—j．an，L1-U Biomedical LIU Lu，XUEJian-xin。WANChao—min，WANG of Yan-you，GAN Zheng—rong△．Department ChinaSchoolofPreclinicalandForensicMedicine，Sichuan 610041， Engineering，West University，Chengdu China thecDNA of ofhuman By librarysuprachiasmaticnucleus(SCN)region [Abstract]Objectivescreening tO thenovel withPERland the hypothalamus，wetry capture proteinsinteracting investigateinterplaying characteristicofRACKlandPERl．Methods new inhumanSCN， Byyeasttwo-hybridsystem，theprotein whichwas withPERl一PASdomainwasobtained．Thenfivetruncated ofRACKleDNAwas associating fragments form andwasco-transformedinto strain clonedinto vectortO recombinantlibrary yeast