异鼠李素对过氧化氢所致内皮细胞损伤保护作用.pdfVIP

异鼠李素对过氧化氢所致内皮细胞损伤的保护作用 专业：药理学研究生：滕丹导师：程嘉艺副教授 摘要 损伤的最佳浓度，在模型的基础上，用MTT法测定异鼠李素对内皮细胞相对活力的影响； mRNA的相对表 荧光强度的变化；荧光分光光度法测定内皮细胞培养液中LDH的含量；WesternBlot法测定 内皮细胞caspase．3的活性；共聚焦激光扫描显微镜测定细胞内游离钙离子浓度的变化。结果： 减少细胞内游离钙离子浓度的增加幅度。结论：异鼠李素具有内皮细胞保护作用，其保护作 用机制与其抑制细胞内钙离子浓度的升高和其降低caspase．3的活性有关。 关键词：异鼠李素；内皮细胞损伤；H／Oz；保护作用 前言 异鼠李素是一种己知的黄酮类化合物，在沙棘中含量较高，通常作为标准品用以测定沙 棘总黄酮的含量，异鼠李素和槲皮素同为沙棘总黄酮中的主要单体成分【11。目前的研究表明： 沙棘总黄酮与槲皮素均有较好的抗心肌缺氧、缺血，缓解心绞痛，抗心律失常，抗氧自由基， 降低血清胆固醇等多种心血管效应。但对于异鼠李素的研究目前多集中于其抗肿瘤方面，对 其在心血管系统中的作用研究较少。血管内皮细胞是位于循环血液与血管壁内皮下组织之间 的单层细胞，血管内皮细胞损伤在血栓与止血，动脉粥样硬化，炎症及免疫反应等一系列病 理过程中起重要作用，因此本课题利用过氧化氢损伤内皮细胞模型，探讨异鼠李素是否能够 保护过氧化氢损伤的内皮细胞，进一步阐明沙棘总黄酮中抗血栓的主要物质，进而为开发利 用沙棘资源提供科学依据。 实验材料 1细胞系 2药物与试剂 异鼠李素：南京青泽医药科技开发公司，标准品，纯度98％，淡黄色粉末 芍药苷：南京青泽医药科技开发公司，标准品，纯度98％，乳白色粉末 Abstract was effectandits toobserve Objective：Thestudy antiapoptotic mechanismof vein isorhamnetinacidonhumanumbilical cell S induced theendothelialcel1 apoptosi byH202。Method：culture inVitro，UsetheMTTmethodtoSievethebest H202 OnthebasiS ofthe MTTi in model，Determination by cellS endothelialrelativetothe of impact cellsdetectedELISAmediumt-PAPAI-1 ofPAI-I by and levelS；RT—PCR mRNA ELISA cellSdetected andmedi