大鼠连合下器Nestin、Sox2及BrdU阳性细胞的形态学观察.pdf

lY0吣2哪3咖9咖7舢吣7咖8删2Im 目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………4 英文缩写……………………………………………………………………10 前言……………………………………………………………………1—1一日U舌…………………………………………………………………… 材料与方法……………………………………………………………11 结果……………………………………………………………………20 附图……………………………………………………………………24 附表……………………………………………………………………35 讨论……………………………………………………………………36 结论……………………………………………………………………37 参考文献………………………………………………………………37 综述神经干细胞研究进展………………………………………………41 致谢…………………………………………………………………………49 个人简历……………………………………………………………………50 中文摘要 摘 要 方法：选择SD大鼠32只，清洁级，雌雄不限，6．8周龄，体重2009 各一次，时间间隔为2小时。 l标本取材 (1)正常动物模型标本取材：将SD大鼠17只，在水合氯醛 为两组，选取含连合下器部分，一组进行脱水，透明，包埋，石蜡切片机 5％蔗糖溶液脱水，30％蔗糖溶 冠状面切片，厚度为5prn。另一组进行1 液脱水，恒温冰冻切片机冠状面切片，厚度为109rn。 对实验动物进行连续三天Brdu生理盐水溶液腹腔注射，每天两次，间隔 后固定。将组织标本随机分为两组，选取含连合下器部分，一组进行脱水， 透明，包埋，石蜡切片机冠状面切片，厚度为59m。另一组进行15％蔗 糖溶液脱水，30％蔗糖溶液脱水，恒温冰冻切片机冠状面切片，厚度为 109rn。 2染色 (1)甲苯胺蓝染色：将上述标本取材中获得的石蜡切片经甲苯胺蓝 BX．UCB观察照相。 染色，中性树胶封片后Olympus (2)免疫组织化学染色：将上述标本取材中获得的石蜡切片分别经 BX．UCB观察照相。 染色后，使用中性树胶封片之后Olympus (3)免疫荧光组织化学双标染色：将上述标本取材中获得的冰冻切 中文摘要 BX．UCB 组织化学双标染色后，使用抗荧光衰减封片剂封固后，Olympus 观察照相。 3统计学处理 Plus6．0 实验结果中所示阳性细胞采用专业图像分析软件Image．Pro 测定平均光密度值和大小。经SNK—q检验，以PO．05为有显著性差异。 结果： 1甲苯胺蓝染色结果观察 冠状面切片经甲苯胺蓝染色后，通过光镜观察可见：SCO与第三脑 室侧壁室管膜分界鲜明，由两层细胞构成：一层是靠近室管膜的室管膜 细胞层，染色较深，靠近脑室面(腹侧)的一半无明显细胞结构，呈均 质状，染色不均匀，血管少，另一半远离脑室面(背侧)，细胞轮廓界限 清楚，整齐排列，染色较腹侧侧稍深，但在两侧面，各有一处染色略浅， 形状似猫耳状，细胞结构不清，组织排列疏松，值得注意的是这两个区 域周围血管丰富；另一层为其深面的室管膜下细胞层，染色较浅，与周 围脑组织细胞形态一致，无细胞结构，但可见纤维样结构。两层细胞呈 极性排列。第三脑室侧壁的细胞间的界限清楚，排列整齐，由单层立