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小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG)-ELISA试剂盒说明书
小鼠N-乙酰-β -D-氨基葡萄糖苷酶 (NAG)酶联免疫吸附测定
试剂盒
使用说明书
产品编号:E-EL-M0812
(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)
声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用
专业ELISA kit 生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上
清液中天然和重组NAG 浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时
联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
试剂盒组成:
名称-中文 名称-英文 规格 保存条件
ELISA 酶标板 Micro ELISA Plate 8×12 / 8×6* 4℃
冻干标准品 Reference Standard 2/ 1 支* 4℃
标准品样品稀释液 Reference Standard Sample Diluent 1 瓶 20mL/12mL* 4℃
浓缩生物素化抗体 Concentrated Biotinylated Detection Ab 1 支 120μL/70μL* 4℃
生物素化抗体稀释液 Diluent for Biotinylated Detection Ab 1 瓶 10mL/6mL* 4℃
浓缩HRP 酶结合物 Concentrated HRP Conjugate 1 支 120μL/70μL* 4℃(避光)
酶结合物稀释液 Diluent for HRP Conjugate 1 瓶 10mL/6mL* 4℃
浓缩洗涤液 (25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1 瓶 30mL/16mL* 4℃
底物溶液 (TMB ) Substrate Reagent 1 瓶 10mL/6mL* 4℃(避光)
反应终止液 Stop Solution 1 瓶 10mL/6mL* 4℃
封板覆膜 Plate Sealer 5/3 张*
产品说明书 Product Description 1 份
*: [96T/48T] (打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠NAG抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中
的NAG会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠NAG抗体和辣根过
氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠NAG抗体与结合在包被抗体上的小鼠NAG 结合、生物素与亲和
素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB) ,TMB在辣根过氧化
物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,NAG浓度与OD450
值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中NAG 的浓度。
标本收集:
1. 血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集
血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可
检测。避免使用溶血,高血脂标本。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞
会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS (一般按1:9的重量
体积比,比如1g的组织样本对应9mL 的PBS ,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记
录。推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂
解组织
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