酸敏感离子通道蛋白和组织型激肽释放酶相互作用的研究.pdfVIP

324 Neural Inj ury and Functional Recon st ruction ,Sept ember 2009 ,Vol . 4 ,No . 5 【DO I】　10 . 3870/ sj sscj . 2009 . 05 . 005 ·论著 · 酸敏感离子通道蛋白与组织型激肽释放酶 相互作用的研究 苏敬敬 ,董强# 复旦大学附属华山医院神经内科 ,上海 200040 ( ) ( ) 　　【摘要】　目的:观察酸敏感离子通道蛋白 A SIC1a 、A SIC2a 与组织型激肽释放酶 T K 之间是否存在相互作 用 。方法 :R TPCR 分别获得小鼠 T K 、A SIC1a 、A SIC2a 全长 cDN A ,将其克隆入真核表达载体 p cDN A3 . 1/ Mychi s 中 ,脂质体法分别将 p cDN A3 . 1T K 和 pcDN A3 . 1A SIC1a 、pcDN A3 . 1T K 和 p cDN A 3 . 1A SIC2a 共转染至人胚胎 ( ) 肾细胞 H E K293 T ,免疫共沉淀分别用抗 Myc 及抗 T K 抗体观察两者间有无相互作用 。将 A SICs 融合蛋 白与 ( μ ) T K 100 g/ mL 共孵育 , SD SPA GE 分别用抗 Myc 及抗 T K 抗体检测蛋 白表达 。结果 :pcDN A3 . 1T K 和 pcD N A3 . 1A SIC1a 、p cDN A3 . 1T K 和 pcDN A3 . 1A SIC2a 共转染后 ,SD SPA GE 显示抗 T K 抗体检测后在转染细胞内 见有56 kDa 的 T K 条带出现 ,但抗 Myc 抗体作用未见 A SICs 目的条带出现 。纯化的 A SIC1a 、A SIC2a 融合蛋白与 T K 共孵育后 ,SD SPA GE 显示抗 Myc 抗体检测后在约 66 kDa 处有融合蛋 白表达条带 ,但抗 T K 抗体检测后在 56 kDa处无条带出现 。结论 : T K 与 A SIC1a 、T K 与 A SIC2a 之间无相互作用 。 【关键词】　酸敏感离子通道 ;组织型激肽释放酶 ;相互作用 ;重组质粒 ( ) 【中图分类号】　R74 1 ;R74 1. 02 　【文献标识码】　A 　【文章编号】　100 1117X 2009 ▲ ▲ Interaction bet ween AcidSensing Ion Channels and Tissue Kallikrein 　S U J i ngj i ng , D ON G Qi ang . D ep a rtment of N eu rology , H uas han H osp i t al , F u d an Uni v