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壳聚糖载基因纳米粒子荧光标记的优化研究
生物医学工程与临床 年 月第 卷 第 期
2008 1 12 1 BMEClinMed,January2008,Vol.12,No.1 -9-
·基础研究·
壳聚糖载基因纳米粒子荧光标记的优化研究
1 2 1 1 1
张海玲 ,朱敦皖 ,董 霞 ,刘兰霞 ,冷希岗
摘 要:目的 研究荧光素异硫氰酸酯( )与壳聚糖反应的主要影响因素,观察荧光标记对纳米粒子表征和转染效
FITC
率的影响,以期建立一种快速、稳定并且适宜壳聚糖纳米载体示踪的荧光标记方法。方法 FITC与壳聚糖在不同反应物
比例、溶液pH及温度条件下反应,纯化并收获产物,计算其标记效率。采用复凝聚法制备荧光标记的壳聚糖载基因纳米
粒子,并检测其表征及对 细胞转染效率。结果 在该实验中,标记效率随着 增大而增加,弱碱性( )时最佳;
Hela pH pH7.5
随着反应温度的升高,标记效率也随之上升;标记效率还随FITC添加的比例增大而升高。壳聚糖纳米粒子表征和转染
效率实验显示最佳的壳聚糖标记条件是反应物壳聚糖与 的添加比例为 ,在 、室温 条件下反应 。结
FITC 25∶1 pH7.5 25℃ 4h
论 优化的壳聚糖荧光标记方案的标记率比以前文献报道的方法高近 倍,用标记的壳聚糖制备的基因纳米粒子粒径
3
及细胞转染效率与未标记壳聚糖制备的纳米粒子相近,可以达到较好的示踪效果。
关键词:壳聚糖;纳米粒子;荧光标记
中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( )
R318.08 A 1009-7090200801-0009-04
Optimizationoftheassayforlabelingchitosan-DNAnanoparticleswithfluoresceinisothiocyanate ZHANGHai-
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, , , , ( ,
lingZHUDun-wanDONDXiaLIULan-xiaLENGXi-gang 1.TianjinKeyLaboratoryofBiomedicalMaterials
, , , ; ,
InstituteofBiomedicalEngineeringCAMSandPUMCTianjin 300192China2.InstituteofPolymericMaterialsTianjin
, , )
UniversityTianjin 300072China
Correspondingauthor:LENGXi-gang.E-mail:l
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