禽呼肠孤病毒S1733株单克隆抗体的制备及特性鉴定.pdfVIP

中国畜牧兽医 2012年第39卷第1l期 生物技术 ·47· 谢志勤，谢芝勋，刘加波，庞耀珊，邓显文，谢丽基，彭宜，范晴 (广西壮族自治区兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，广西南宁 530001) 摘要：将增殖的禽呼肠孤病毒S1733毒株进行浓缩，然后进行蔗糖梯度纯化，测定纯化后病毒的浓度，按每只鼠100肚g的 选，阳性孑L经3次有限稀释法克隆。通过间接EI，IsA方法测定抗体效价，并通过western 和中和反应等方法对2株单克隆抗体特性进行检测。试验结果表明，纯化的病毒含量为43mg／mL，用纯化的病毒免疫 BALB／c小鼠后与骨髓瘤细胞融合，通过克隆筛选成功获得2株能稳定传代并分泌抗禽呼肠孤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞 株sF63K3和sB2 与其他病毒株没有交叉反应，具有良好的特异性，并且这2株单克隆抗体没有中和禽呼肠孤病毒的能力，具有识别禽呼肠孤病 毒的能力，可以用于禽呼肠孤病毒的特异性检测。 关键词：禽呼肠孤病毒；单克隆抗体；制备；鉴定 9．4 中图分类号：S852．651 文献标识码：A 文章编号：167卜7236(2012)11一0