基因表达调控真核.ppt

第二节 真核生物基因的表达与调控 1、真核生物基因转录 2、转录后修饰（Post-transcriptional Modification） 3、真核生物基因表达调控 1、真核生物的转录 Transcription in Eukaryotes 真核生物的转录 3种RNA聚合酶 启动子和增强子（ Promoters and Enhancers ） 通用转录因子，RNA Pol II起始（ General Transcription Factors and RNA Pol II Initiation ） 真核转录因子（ Eukaryotic Transcription Factors ） 例子 1.1 三种RNA聚合酶的特性及功能 1.1.1分类 3种RNA 聚合酶由不同位点的基因转录其活性差异通过对α鹅膏菌素（ α-amanitin ）毒性的敏感性区分。 Specific for eukaryotic polymerases Pol II 最敏感 Pol III 次之 Pol I 不敏感 RNA 聚合酶 I ：位于核仁，负责合成大多数rRNA前体； RNA 聚合酶 II ：位于核浆负责合成 mRNA 前体和小核RNAs（SnRNAs）； RNA 聚合酶 III位于核浆（ nucleoplasm ）负责合成 5S rRNA 前体和SnRNAs, tRNA、SnRNA其它 胞质 RNA。 1.1.2 RNA 聚合酶亚基 每个聚合酶都有12个或12个以上的不同亚基； 3种酶最大的2个亚基相同，且类似于原核E. Coli RNA 聚合酶的β’ 和 β 亚基；. 其它亚基与E. coli RNA 聚合酶的α 亚基有同源性。 其中5个亚基在3种聚合酶中相同,其它亚基不同。 1.1.3 真核生物聚合酶活性 象原核RNA聚合酶一样,真核RNA聚合酶不需要引物,按照 5’到 3’方向合成RNA； 需要辅因子参与DNA结合(原核生物不要)。 1.1.4 RNA Pol II羧基末端结构域 RNA聚合酶II的最大亚基C末端有7氨基酸重复称为羧基末端结构域（carboxyl-terminal domain ，CTD）。 顺序 Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser,鼠的RNA聚合酶II重复52次 并磷酸化。 1.2 启动子与增强子 启动子（ Promoters ） 增强子（ Enhancers ） 1.2.1 启动子 很多RNA Pol II 启动子 含有 TATA盒，其位于起始位点上游 25-30 bp ； 起始子元件（ initiator element ），其与起始位点重叠； 这些元件负责转录复合物的形成和转录起始。 上游调控元件（Upstream regulatory elements） 启动子上游 100-200 bp 为高效转录所必须； Examples : GC和CCAAT盒。 1.2.2增强子 (Enhancer) 这些顺序元件能活化转录,其位于起始位点上游或下游上千个碱基对.他们的活性可能具有组织特异性 或普遍存在, 并含有序列基序(sequence motifs). Promoter 为转录所必需 Enhancers 能从远端影响转录 1.3 通用转录因子与RNA Pol II起始 RNA Pol II 基本的转录因子： TFIID、TBP、TFIIA RNA Pol II起始 TFIIB 与RNA 聚合酶结合； 其它因子的结合； CTD 被TFIIH磷酸化； 转录起始复合物 (The initiator transcription complex) 形成 RNA Pol II 基本的转录因子 有与RNA Pol II 启动子结合并一起启动转录的一系列复杂的转录因子； 这些转录因子和其组成亚基有很多还待鉴定，其命名： TFIIA, B, C, etc。 TFIID TFIID 与 TATA 盒结合，其由 TATA结合 (TATA-binding protein ，TBP)多蛋白复合物和多重辅助因子 （TBP-associated factors， TAFIIs ）组成。 TBP TBP为三类RNA聚合酶转录起始所需的转录因子， (是组成TFIID, SL1,和TFIIIB的成员)； 其有一个鞍状结构（saddle structure），在TATA 盒与 DNA的小沟结合, 使DNA 解链并产生45o弯曲。 CTD 被TFIIH磷酸化 TFIIH能使 RNA Pol II 的羧末端结构域CTD磷酸化，促进聚合酶复合物形成。 转录起始复合物 TB