培养基的分类.docVIP

培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。 (1) 按成分不同划分 1)天然培养基(complex mediurn) 这类培养基含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物，也称非化学限定培养基(chemically undefined mediunl)。牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。基因克隆技术中常用的LB(Luria—Bertani)培养基也是一种天然培养基，其组成见表4—10。 常用的天然有机营养物质包括牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4—11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡萝卜汁、椰子汁等，嗜粪微生物(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。天然培养基成本较低，除在实验室经常使用外，也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。 表4—11 牛肉浸膏、蛋白胨及酵母浸膏的来源及主要成分 营养物质 来 源 主要成分 牛肉浸膏 蛋白胨 酵母浸膏 瘦牛肉组织浸出汁浓缩而成的膏状物质 将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成 的粉末状物质 酵母细胞的水溶性提取物浓缩而成的膏状物质 富含水溶性糖类、有机氮化合物、维生素、盐等 富含有机氮化合物、也含有一些维生素和糖类 富含B类维生素，也含有有机氮化合物和糖类 2)合成培养基(syntheticmedium) 合成培养基是由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined mediurn)，高氏I号培养基和查氏培养基就属于此种类型。配制合成培养基时重复性强：，但与天然培养基相比其成本较高，微生物在其中生长速度较慢，一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。 (2) 根据物理状态划分 根据培养基中凝固剂的有无及含量的多少，可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。 1) 固体培养基(solidmedium) 在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态即为固体培养基。理想的凝固剂应具备以下条件：①不被所培养的微生物分解利用；②在微生物生长的温度范围内保持固体状态，在培养嗜热细菌时，由于高温容易引起培养基液化，通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题；③凝固剂凝固点温度不能太低，否则将不利于微生物的生长；④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用；⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏；⑥透明度好，粘着力强；⑦配制方便且价格低廉。常用的凝固剂有琼脂(agar)、明胶(gdatin)和砖胶(silica gel)。表4—12列出琼脂和明胶的一些主要特征。 对绝大多数微生物而言，琼脂是最理想的凝固剂，琼脂是由藻类(海产石花菜)中提取的一种高度分支的复杂多糖；明胶是由胶原蛋白制备得到的产物，是最早用来作为凝固剂的物质，但由于其凝固点太低，而且某些细菌和许多真菌产生的非特异性胞外蛋白酶以及梭菌产 生的特异性胶原酶都能液化明胶，目前已较少作为凝固剂；硅胶是由无机的硅酸钠(Na2Si03)及硅酸钾(K2SiO3)被盐酸及硫酸中和时凝聚而成的胶休，它不含有机物，适合配制分离与培养自养型微生物的培养基。 表4—12 琼脂与明胶主要特征比较 内 容 琼 脂 明 胶 常用浓度(％) 熔点(℃) 凝固点(℃) pH 灰分(％) 氧化钙(％) 氧化镁(％) 氮(％) 微生物利用能力 1．5--2 96 40 微酸 16 1．15 0．77 0，4 绝大多数微生物不能利用 5～12 25 20 酸性 14一15 0 0 18．3 许多微生物能利用 除在液体培养基中加入凝固剂制备的固体培养基外，一些由天然固体基质制成的培养基也属于固体培养基。例如，由马铃薯块、胡萝卜条、小米、麸皮及米糠等制成固体状态的培养基就属于此类。又如生产酒的酒曲，生产食用菌的棉子壳培养基。 在实验室中，固体培养基一般是加入平皿或试管中，制成培养微生物的平板或斜面。固体培养基为微生物提供一个营养表面，单个微生物细胞在这个营养表面进行生长繁殖，可以形成单个菌落。固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏等。 2) 半固体培养基(semisolid medium) 半固体培养基中凝固剂的含量比固体培养基少，培养基中琼脂含量一般为0．2％—0．7％。半固体培养基常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定等。 3) 液体培养基(1iquidmedium) 液体培养基中未加任何凝固剂。在用液体培养基培养微生物时，通过振荡或搅