家蚕微孢子虫ADPATP转运蛋省略的原核表达及间接免疫荧光定位分析党晓群.pdfVIP

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2015-09-26 发布于重庆
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家蚕微孢子虫ADPATP转运蛋省略的原核表达及间接免疫荧光定位分析党晓群.pdf

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家蚕微孢子虫ADPATP转运蛋省略的原核表达及间接免疫荧光定位分析党晓群

: 昆虫学报Acta Entomologica Sinica ，March 20 14 ，57 (3) 300 － 307 ISSN 0454 -6296 家蚕微孢子虫ADP / ATP 转运蛋白的原核表达及间接免疫荧光定位分析 1 ，# 2 ，# 2 2 2 2 1 ，2 ，* ，，，，，，党晓群林立鹏李春峰潘国庆李田龙梦娴周泽扬 (1. ， 40 1331 ;2. ，， 4007 16) 重庆师范大学动物生物学重点实验室重庆西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室重庆 :【】 Nosema bombycis ADP / ATP 。摘要目的家蚕微孢子虫转运蛋白可能参与搬运宿主细胞的能量本研究克隆家蚕 ADP / ATP ，、，微孢子虫转运蛋白基因并进行原核表达抗体制备及间接免疫荧光定位为控制和防治家蚕微粒子病。【】 N. bombycis ADP / ATP ，提供理论基础方法通过同源序列比对鉴定家蚕微孢子虫转运蛋白序列采用生物合成 3 ， Bgl Sal ， pUC57 的方法将编码段面向膜内侧肽段的核酸序列拼接合成在其两端引入 Ⅱ和 Ⅰ酶切位点克隆至载， (dihydrofolate reductase ，DHFＲ) pQE40 ，体并测序再亚克隆至含有二氢叶酸还原酶标签的表达载体中然后利用 BamH Sal DHFＲ， pET30a (+ ) 。 SDS- Ⅰ和 Ⅰ酶切获得含有标签的重组序列并连接至载体中进行诱导表达通过 PAGE 、， ADP / ATP 。【镍柱亲和层析和免疫印迹法鉴定表达蛋白利用间接免疫荧光对转运蛋白的分布进行检测结】 ADP / ATP (GenBank EOB13854. 1) 1 524 bp ，果家蚕微孢子虫的转运蛋白编码序列登录号为