炭疽PA和芽孢双组分候选疫苗免疫豚鼠的免疫学初步评价.pdfVIP

中国医药生物技术2013年4月第8卷第2期 ChinMedBiotechnol，April2013，V01．8，No．2 DOI：10．3969／cmba．j．issn．1673-713X．2013．02．008 ·论著· 炭疽PA和芽孢双组分候选疫苗 免疫豚鼠的免疫学初步评价 卢锦标，魏东，王国治 【摘要】 的免疫保护效果相近，提示除了PA，炭疽芽孢中 目的对豚鼠免疫重组PA抗原和甲醛灭活芽孢组成的炭 的抗原对免疫保护效果也起着重要作用[2‘3]。本研 疽候选疫苗，评价其免疫效果。 究利用重组PA抗原(rPA)和甲醛灭活芽孢 inactivated 方法将豚鼠随机分成5个实验组，分别免疫高、中、低 (formaldehyde 剂量候选疫苗、炭疽活疫苗或生理盐水：免疫后不同时间点 铝凝胶吸附后制备炭疽双组分候选疫苗，在豚鼠模 采血进行抗体检测、xTT法淋巴细胞增殖检测以及皮肤迟 型中，评价该候选疫苗的免疫应答，为炭疽新疫苗 发型超敏反应检测。 的改进提供参考。 结果抗体检测结果显示，双组分炭疽候选疫苗能诱导较强 的体液免疫应答：XTT细胞增殖结果显示，外周血淋巴细 1材料与方法 1．1 材料 胞特异性增殖不明显，但所有候选疫苗组针对rPADTH阳 1．1．1试剂和仪器rPA抗原和甲醛灭活芽孢由 转率24h后均为100％。 中国食品药品检定研究院结核病疫苗室制备： 结论 双组分炭疽候选疫苗能诱导豚鼠产生体液免疫和细 胞免疫应答。 吩嗪硫酸甲酯(PMS)为美国Sigma公司产品； 【关键词】芽孢杆菌，炭疽； 炭疽菌苗； 豚鼠； 免 辣根过氧化物酶标记的山羊抗豚鼠IgG为美国 疫评价 SantaCruz www．cmbp．net．cn 中国医药!物技术．2013．8《2)：125．128 分离液购白天津灏洋生物技术有限责任公司；MK3 酶标仪为芬兰LabsystemsDragon公司产品。 炭疽是由炭疽杆菌引起的人畜共患传染病。受 炭疽杆菌感染的食草动物是人类最主要的传染源， 龄，由中国食品药品检定研究院实验动物中心提 虽然人类中的炭疽发病率并不高…，但炭疽杆菌作 为细菌战或生物恐怖袭击首选，如2001年美国炭 实验过程中饲养于中国食品药品检定研究院清洁 疽邮件事件，潜在威胁不容忽视。 级动物房。 我国现用的炭疽疫苗是人用减毒活疫苗，主要 1．2方法 成分是活的炭疽芽孢，采用皮上划痕接种方式，存 1．2．1分组及免疫将40只豚鼠随机分为5组， 在接种剂量难以保证，副反应较重等问题。国外常 每组8只，雌雄各半。①对照组：AI(OH)3佐剂； 用的炭疽疫苗有AVA(美国)和AVP(英国)，由 减毒株培养后，除菌滤液加氢氧化铝吸附制备而 antigen，PA)是其中最 成，保护性抗原(protective 主要的免疫原，其他抗原成分较复杂，存在难定性