双壳贝类染色体标本制备技术的优化.pdfVIP

基因组学与应用乍物学，2009年，第28卷，第3期，第515-518页 Genomiesand 15—518 AppliedBiology,2009，V01．28，No．3，5 实验技术与方法 and TechniquesMethodology 双壳贝类染色体标本制备技术的优化 黎明王嫣‘顾志峰石耀华王爱民‘ 海南大学海洋学院，教育部热带生物资源重点实验室，海南省热带水生生物技术重点实验室，海121，570228 ’通讯作者．wy2005@163．corn；aimwang@163．eonl 摘要本研究以牡蛎、咬齿牡蛎鳃细胞为材料，采用PHA处理法、低温同步化法及活体去壳法进行预处 理，制作成染色体标本；以马氏珠母贝、企鹅珍珠贝担轮幼虫为材料，采用PHA促繁殖获取胚胎法，制作胚胎 染色体标本。对不同时间不同处理方式获得牡蛎染色体分裂相比例、PHA促繁殖获取胚胎法获得马氏珠母 贝染色体分裂相比例进行统计。结果发现，PHA处理法在24h时能获取最多分裂相(3．50‰)，低温同步化法 在72 法获得最大分裂相比例(10．00％0)。4种方法都能获得理想的中期分裂相数目。其中，低温同步化法缺点是温 度难控制、预处理时间长；活体去壳法易导致贝类死亡；PHA促受精获取胚胎法缺点是胚胎的获取受繁殖季 节限制。PHA处理法预处理时间短、获取分裂相数目多，无疑是贝类成体染色体制备的最好的方法。同时， PHA也为贝类人工繁殖提供了一种更为有效的手段。 关键词双壳贝类，染色体，标本，制备技术 inBi— ofMethodsfor of Chromosome Optimization PreparationMetaphase valve Li Yan‘Gu ShiYaohua Aimin‘ MingWang Zhifeng Wang TheOcean ofHainan ofEducation,I-IainanKey Hy- College Univeraity,KeyLaboratoryofTropicBiologicalResources’Ministry LaboratoryofTropical drobiologyTechnology,Haikou,570228 ’Correspondingauthors，wy2005@163．eom；aimwang@163．COl DOI：10．3969／gab．028．000515 totreatthe of AbstractThree and a used methods，PHA，low shell，were gill temperaturesynchronizingtipping of andPterkz CrassostreaSaccostreamordax．PHAwasusedtotreatthe cellsHnctadamartensi sp．and gill pen- wereusedforchromosome the obtainedinfourdifferentmethods guin,earlyembryos preparation．Thenmetaphases differenttissuesweretreatedallthe werecounted