木榄CaM基因的克隆及序列分析.pdfVIP

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木榄CaM基因的克隆及序列分析.pdf

生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 2010 12 CaM 1, 2 1 3 2 2 2 庞俊峰 于卓 张占路 房永雨 唐益雄 吴燕民 1 2 3 ( , 010019; , 100081; , 518040) : 以深圳红树自然保护区的木榄为 料, 根据 GenBank上已公布的钙调蛋白氨基酸保守区的碱基序列设计引 物, RTPCR扩增木榄 CaM 序列, 获得 cDNA 全长 735 bp, 命名为 B CaM ( GenBank登录号: GU722140) 生物信息学分析表明, B CaM 与拟南芥花生大麦榉木及甘薯等植物钙调蛋白氨基酸保守区具有较高同源性B CaM 基因完整开放阅读框为 450 bp, 编码 149 个氨基酸, 预测蛋白等电点为 4. 11, 分子量为 16. 8 kD分析基因序列和相应酶切位点, 将扩增获得的 B CaM 基 因完整开放阅读框与中间表达载体相应酶切产物进行连接, 构建植物表达载体 pC13rd29AB CaM, 为 B CaM 功能分析和进一 步利用奠定了基础, 为植物转基因研究与应用又增添了一个新的基因源 : 木榄 钙调蛋白 基因克隆 生物信息学 载体构建 The Cloning and Research of CaM on Bruguiera gymnorrhiza 1, 2 1 3 2 2 2 P an Junfen Yu Zhuo Zhan Zhanlu Fan Yon yu T an Y ixion W u Y anm in 1 ( Colleg e of Ag ronomy, InnerM ong olia Ag ricultural University,H uhhot 010019; 2 B iotechnology R esearch Institute, Ch ineseA cademy of Ag ricultural Sciences, B eij ing 100081; 3 Shen henN ongke Group Corp oration, Shen hen 518040) Abstrac:t B rug uiera gym norrhi a as m aterials in this study wh ich collected from the Shenzhen m an rove natu re reserves. This study referenced other CaM enes have been reported from GenBank. Based on the h i hly conserved nucleotide sequence in the re ion of am ino acids, w e cloned the full len th CaM cDNA sequencew hich is 735 bp from

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