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包埋一脱水法常温和低温保存两种等鞭金藻的研究 摘要 植物种质资源的保存研究对于生物多样性保护及新品种选育均具有十分重要的意 义。植物种质资源的多样性更是维持生态平衡的重要前提，直接关系到全人类的生存和 农业发展的趋向。但是自20世纪以来，人们只着眼于加快经济建设的步伐，而忽略了 生态环境的保护，致使植物种质资源多样性不断遭到破坏。在市场经济飞速发展的今天， 人们自我生活需求的转变，不仅注重的是原先的物质生活，而对良性生存环境等精神生 活的高品质追求更是逐级提升。因此，保护生态环境及动植物种质资源、建设生态文明 型的可持续发展的社会，已成为全球关注的课题。 藻类不但可以食用，还可以用做海产养殖的饵料、农业生产的肥料、工业及医药的 原料等，在国民生产中具有十分重要的经济价值。因此，作为植物种质的一部分，海洋 藻类种质的保存研究同样具有着重要的意义。作者首先对有关高等植物和藻类植物的种 质保存的研究进展、主要技术和应用前景作了概述。 本文以湛江等鞭金藻(Isochrysis 3011)为实验材料，用包埋一脱水法进行常温和低温保存，探讨了保存温度、光 galbana (暗)、抗冻保护剂、胶球含水量、胶球中的藻细胞密度、保存空间体积、密封袋材质 及脱水速率等因素对两种金藻常温和低温保存的影响。结果表明： 1．温度和抗冻保护剂对存活率的影响。 在不加保护剂暗中保存时，两种金藻在所设置的3个保存温度下保存6个月的存活 率总的来说都很低。但相比之下，4C保存的存活率要明显高于20℃和-30℃的存活率。 当加入保护剂甘油后，湛江等鞭金藻和球等鞭金藻3011的存活率都有很大的提高，分 别达到63．3％和61．0％。这是由于甘油的加入有效的防止了冰冻伤害，而-30℃低温可以 大大降低藻细胞的呼吸强度，因而显著的提高了保存效果。当保存期延长至18个月时， 两种金藻的存活率仍然分别达到36．1％和32．4％。这为两种金藻的中长期保存提供了可 靠的实验依据。 2．光照对存活率的影响 相同温度下，弱光的保存环境对两种金藻存活率明显有利。在20℃保存6个月时， 湛江等鞭金藻在弱光中存活率达26．6％，而暗中仅为0．4％；球等鞭金藻3011在弱光下 的存活率为14．2％，暗中仅为O．7％。4℃保存6个月时，湛江等鞭金藻在弱光及暗中的 藻在弱光照下都能保持一定的光合强度。 3．胶球含水量对存活率的影响。 两种金藻的存活率随胶球含水量的变化相似。20℃时两种藻细胞的存活率随着含水 量的减少而降低；4℃时两种藻细胞的存活率随着含水量的减少先升高后降低，在含水 包埋一脱水法常温和低温保存两种等鞭金藻的研究 量为90．9％时达到最高；一30℃时藻细胞存活率随含水量的变化与4℃类似，也是先升高 后降低，只是存活率在含水量为81．1％时达到最高。 4．胶球藻细胞密度对存活率的影响。 X107／细胞时， 两种金藻的存活率随胶球藻细胞密度的变化一致。当胶球密度为O．5 在各个含水量与保存温度下，均能得到更高的存活率；而胶球密度为2．O×10。7／细胞时， 存活率普遍很低。 5．胶球保存空间体积、密封袋材质及脱水速率对存活率的影响。 对两种金藻的研究发现，以较小的保存空间体积保存胶球、密封袋的外膜用铝塑膜 代替农用聚乙烯膜、以及脱水速率为每小时含水量减少O．9％时有利于提高存活率。 6．保存前后的生长曲线和生长速率的测定。 本文分别用保存6个月和12个月的两种金藻细胞接种，测定其生长曲线和生长速 率。实验结果证明经过一定时期的恢复培养，两种金藻的藻细胞均可正常生长繁殖。 本文首次采用包埋一脱水法，在常温和低温下保存湛江等鞭金藻和球等鞭金藻3011， 经过探讨和比较，发现在适当条件下可以实现两种金藻的中长期保存，而且包埋一脱水 法实验操作和保存条件比较简单，又无需贵重的仪器设备，因此在藻类种质的中长期保 存中可能有广阔的应用前景。 关键词：湛江等鞭金藻；球等鞭金藻3011；常温和低温保存；包埋一脱水法 包埋一脱水法常温和低温保存两种等鞭金藻的研究 Abstract has in Studiesonthe