辐射导致长期骨髓抑制机制与MnTE骨髓辐射保护作用试验观察.pdfVIP

1摘要 1-1中文摘要 辐射导致长期骨髓抑制的机制及MnTE骨髓辐射保护作用的试验观察 目的 电离辐射(ionizing bonemarrow 致长期的组织损伤，如长期骨髓抑制(10ng—term stem cells， 致长期骨髓抑制的主要原因是IR诱导的造血干细胞(hematopoietic 也缺乏治疗长期骨髓抑制的有效手段。本课题对辐射导致的长期骨髓抑制的机制进 行了深入研究，并探讨超氧化物歧化酶模拟化合物MnTE对骨髓长期抑制的治疗作 用，为开发新的治疗长期骨髓抑制的药物提供实验基础。 6．5Gy marrow 个月后取小鼠骨髓，进行以下分析：梯度离心分离小鼠骨髓单个核细胞(bone mononuclear M3434 repopulationassay)；BM—MNCs在MethoCult 培养，11天后收取单个CFU—GEMM集落进行细胞遗传学分析；流式细胞仪分选造血 干细胞(hematopoieticprogenitor cells，HPCs)(LSK+)， 造血祖细胞(1in—Sca-1．cKit+，hematopoieticprogenitor 测定两群细胞内活性氧(Reactiveoxygen 化损伤和DNA双链断裂(double—strand cell Cobblestone Cell (C010ny—formingassay)， Area—Formingassay(CAFC) Annexin 试验和单细胞CAFC分析检测两群细胞的集落形成能力； V／PI细胞染色流 技术检测两群细胞中NADPH氧化酶(NADPH 结果在辐射导致骨髓损伤的氧化机制研究中，我们首次发现小鼠接受亚致死 剂量全身照射(6．5Gy 迅速下降至正常水平；而HSCs内活性氧持续维持在高水平，即处于长期氧化应激 】 HSCs集落形成能力降低及HSCs衰老密切相关，但与细胞凋亡无关。进一步研究发 射引起HSCsNOX4表达升高，照射后给予diphenylene 果首次直接证明辐射可能部分通过上调NOX4而选择性提高HSCs慢性氧化应激水 平，诱导HSCs衰老，最终导致长期骨髓抑制。 为了有效预防和治疗核辐射暴露或接受放射治疗患者的长期骨髓抑制，基于 TBI诱导HSCs慢性氧化应激导致长期骨髓抑制的机制，我们试图寻找新的抗氧化剂， 型检测了MnTE对长期骨髓抑制的治疗作用。结果发现，照射后使用MnTE可明显抑 平下降与骨髓中的HSCs数量增加和功能改善有关。照射后使用MnTE治疗小鼠的 眠或静止能力及增殖分化能力损伤具有保护作用，对TBI小鼠HSCs寿命缩短有改 善作用。进一步研究发现，MnTE治疗可降低TBI诱导的HSCs中p16mRNA的表达水 治疗明显改善照射后小鼠HSCs长期再植能力和多系细胞造血重建能力。 结论辐射诱导造血干细胞损伤机制研究发现：TBI选择性诱导HSCs内持续 从而诱发长期骨髓抑制。利用强抗氧化剂MnTE进行试验性治疗，研究发现MnTE可 可能成为有效的TBI损伤治疗药物。 meso—tetrakis (N—ethylpyridinium一2一y1)porphyrin 2 1．2英文摘要 Themechanism BoneMarrow Induced of