雷沙吉兰对乳胞素诱导PD大鼠模型神经保护作用与机制研究.pdfVIP

雷沙吉兰对乳胞素诱导PD模型的 神经保护作用及机制研究 中文摘要 【目的】 l、建立乳胞素诱导PD大鼠模型； 2、探讨雷沙吉兰预处理对乳胞素诱导PD大鼠模型神经元的保护作用，了解雷 沙吉兰治疗和预处理的不同效应。 3、探讨雷沙吉兰的保护作用及机制是否与伴侣蛋白介导吞噬作用(CMA)相关。 【方法】 1、分组与给药：采用随机数字表法将SD大鼠随机分为空白对照组、预处理组 及治疗组3组，每组12只：预处理组与治疗组SD大鼠进行手术造模。雷沙 吉兰给药途径为腹腔注射，每天1次。预处理组sD大鼠造模前7天开始连 续给药，治疗组造模后第7天开始连续给药。 2、SD大鼠造模：参照SD大鼠脑立体定位图谱，通过立体定位技术，将乳胞素 定向注射入SD大鼠左脑黑质部位。空白对照组注射相应体积DMSO。 3、行为学检测：在造模前l天和造模后第6、13天进行，使用大鼠旋转实验进 行评价。 4、大鼠处死与脑组织取材：在造模后10天处死一半大鼠(每组内随机选择)，造 模后20天处死另一半大鼠。所有大鼠在处死后3分钟内于冰上迅速取出中脑 组织，左侧用4％多聚甲醛固定，右侧用灭菌冻存管在超低温冰箱冻存。 5、免疫组织化学法：检测大鼠左侧中脑组织石蜡切片TH、n．syn表达情况，计 数阳性细胞。 6、nⅢEL：检测大鼠左侧中脑组织石蜡切片细胞凋亡，计算平均细胞凋亡率。 平均灰度值比值。 for 8、统计方法：实验数据用SPSSl3．0mndo、Ⅳs统计软件分析，计量资料用均 数±标准差(X±S)表示，P0．05为差异有统计学意义。对实验数据中脑组 织石蜡切片平均旺．syn、TH阳性表达细胞数、平均细胞凋亡率及Hsc70、 L锄p2A平均灰度值比值，分别进行各组间多个样本均数比较。计数资料大 test)检验，P0．05为差异有统 鼠旋转实验阳性率用非参数检验法(Chi．Sq唧e 计学意义。 【结果】 l、行为学检测：模型大鼠在Apo的诱导下，定向右侧旋转，转速大于7印m，30 分钟内超过2lOr。治疗组模型大鼠旋转实验阳性率(58．3％)显著高于预处理组 模型大鼠(16．7％)，空白对照组大鼠不发生旋转。 2、免疫组织化学检测：平均TH阳性细胞数预处理组(3l～35个)与治疗组(19～32 个)模型大鼠较空白对照组(48~62个)显著减少。平均u-syn阳性细胞数预处理 组(8～12个)较治疗组模型(4～5个)大鼠减少。平均TH、仅．syn阳性细胞数预处 理组较治疗组有显著差别，模型大鼠10天组较20天组有差别(P0．05)。 3、n州EL：大鼠左侧中脑组织石蜡切片平均细胞凋亡率，预处理组(0．04l～O．060) 平均细胞凋亡率无显著差别。 与治疗组(5．3～8．1)模型大鼠较空白对照组显著升高，模型大鼠10天组和20 天组无显著差别。 【结论】 l、乳胞素黑质内定向注射可以引起SD大鼠行为学改变，多巴胺能神经元数量 减少，中脑细胞凋亡增多，表明乳胞素黑质内定向注射可以作为建立PD大 鼠模型的方法。 2、雷沙吉兰对乳胞素诱导的PD大鼠模型具有神经保护作用，且预处理用药较 治疗用药对乳胞素诱导的PD模型大鼠的干预作用更强。 3、雷沙吉兰对乳胞素诱导的PD模型大鼠的干预作用与上调Cm途径关键蛋 白Hsc70与L锄p2A相关。 【关键词】 帕金森病；乳胞素；动物模型：SD大鼠；雷沙吉兰；自噬 2 andthe mechanisms of ef．fect Researches underIying neuroprotectiVe ratsmodeIinduced of onthePD Rasagiline