大豆抗氧化肽酶法制备及其活性的保护技术及研究.pdfVIP

摘要 摘 要 大豆活性肽由于其高效的营养价值及功能活性，是目前营养界研究得比较多的一个热门 课题，而且对这方面的研究也具有很实际的经济和利用价值。本试验通过比较六种不同的蛋 白酶对大豆分离蛋白的水解效果，筛选出最适合生产抗氧化肽的Alcalase碱性蛋白酶，用正 交实验法确定了其水解大豆分离蛋白的最佳工艺条件为：底物浓度7．O％、酶用量9000U／g底 物、温度52．5℃、pH值8．5、反应时间5h。在上述条件下，蛋白质水解度为24．28％、氮溶 指数95．7％。蛋白质含量43．5mg／mL，蛋白回收率71．2％。分别从羟基自由基(OH-精除能力、 超氧阴离子自由基(02’·)}青除能力、抑制脂质过氧化(ROO·)能力这三方面研究水解产物的抗氧 46．24％。 采用超滤法对得到的水解产物分离，用截留分子量5000D、2000D的超滤膜将水解产物 化活性。结果显示，分子量小于2000D的组分抗氧化活性最强。因此试验选择截流分子量为 2000D的超滤膜对大豆分离蛋白的水解产物进行分离纯化。在单因素试验的基础上，以膜渗 透通量为响应值设计了4因素(压力、pH值、温度、时间)3水平的响应面实验，通过响应面 件下平均膜渗透通量为28．62L／(m2h)。超滤后其抗氧化活性得到了提高，清除02。·活性由超滤 前317．73U／g升高至超滤后387．9U／g。 得到的活性较高的大豆抗氧化肽，用微胶囊化的方法对其活性进行保护。试验采用了复 凝聚法和复相乳化法制各大豆抗氧化肽微球。复凝聚法的最佳制备工艺为：壳聚糖浓度O．8％， 阿拉伯胶与芯材肽的比8：1，成囊温度45℃，成囊pH4．75。得到的微囊包埋率为64．0％，载 药量11．78％。复相乳化法制各微球最佳工艺是：2．5％海藻酸钠，8．0％的氯化钙，乳化速度 8000rpm，乳化剂浓度8．O％。得到的抗氧化肽微胶囊包埋率73．65％，载药量13．2％。 体外试验证明：两种微球在胃液中的释放率均较低，在肠液中可继续释放，达到了缓释 的目的。包埋后的微囊抗氧化活性比未包埋的肽存放一个月后损失明显减少，说明微胶囊化 使抗氧化肽的活性得到了保护。 关键词大豆肽；酶解：抗氧化：超滤；微胶囊化 Abstract Theantioxidative soybean peptidepruducedbyenzymic methodanditsantioxidative active preservetechnique Abstract research011bioactiveisa innutrition because 而e peptidepopularsubject ithash nowdays Jigh nutritional value，functionalactivitiesandeconomicvalue．This contrastedthe experiment effectofSPI thesi】(different fermentsandchoosedtheAlcalasebasic hydrolytic among proteolytic whichcall thebest protein produce conditionof antioxygenpeptide，theoptimizationtechnology SPlwasdeterm