蛋氨酸对顺铂引起内耳毒性的保护机制与研究.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………．。l 英文摘要……………………………………………………………………．。5 研究论文蛋氨酸对顺铂引起的内耳毒性保护机制的研究 前言…………………………………………………………………………………………99胃U舌………………………………………………………………………………………一…一 材料与方法……………………………………………………………l0 结果……………………………………………………………………16 附图……………………………………………………………………20 附表……………………………………………………………………．37 讨论…………………………………………………………………………………………．。42 结论………………………………………………………………………．．…………………46 参考文献………………………………………………………………46 综述药物性耳聋及防治措施的研究进展………………………………．．50 致谢……………………………………………………………………………59 个人简历……………………………………………………………………60 中文摘要 蛋氨酸对顺铂引起的内耳毒性保护机制的研究 摘 要 目的：顺铂是在临床当中广泛应用的化疗药物，主要用于卵巢癌、睾 丸癌、肺癌、头颈部肿瘤和膀胱癌。虽然其抗肿瘤的疗效可以肯定，但是 它的副作用在治疗的过程中和治疗后发生，这些副作用包括消化道反应、 肾毒性、神经毒性和耳毒性。听力损伤的主要特点是双侧进行性、不可逆 性的，往往累及的是高频听力，严重时可以累及中低频听力。目前的研究 大多集中在顺铂的听力损伤方面，但顺铂导致的前庭功能紊乱同样不能忽 视，前庭功能的紊乱可直接引起患者眩晕并丧失行动能力，这样就严重影 响了许多肿瘤病人康复后的生存质量。 顺铂导致内耳毒性的机制目前尚未完全阐明，其对耳蜗形态的影响主 要表现在Corti器的外毛细胞、血管纹和螺旋神经节三方面，而前庭组织 的形态学暂时还没有充分的报道可供参考。活性氧簇(I的S)在顺铂内耳 毒性中所起的作用得到广泛认可。ROS积聚后产生的亚硝酸盐可以破坏 蛋白质的结构和功能；ROS还作用于构成细胞膜的多不饱和脂肪酸，使 密切相关，而Ca2+内流可直接导致细胞凋亡的发生。此外，耳蜗中存在大 正常的听力是必不可少的，Cx26和Cx30因在遗传性耳聋中的作用而被广 泛关注，但两种蛋白是否参与了顺铂导致的耳毒性和前庭毒性的发病机制， 国内外目前还没有相关研究。在预防耳毒性上，蛋氨酸可以减少顺铂导致 的听功能损伤和耳蜗毛细胞的丢失，是一种很好的内耳保护药物。 我们将通过动物实验来研究蛋氨酸在功能学、形态学、氧化应激水平 和凋亡水平上对顺铂引起的内耳毒性是否均具有保护作用，以及连接蛋白 Cx26和Cx30是否参与了顺铂导致的耳毒性和前庭毒性，蛋氨酸能否对 Cx26和Cx30在顺铂中的变化产生影响。 方法：30只雄性昆明小鼠按照随机原则分为①对照组(n：10)②顺 2ml，1次／天，连续3天；②顺铂组：腹腔注射顺铂溶液15mg／kg体重， 中文摘要 体重，一个小时后，腹腔注射顺铂溶液15mg／kg体重，1次／天，连续3 天。三组昆明小鼠在造模前和造模后，都接受听觉脑干反应(ABR)和前 庭诱发肌电位(ⅦⅧ)的测试来评估听力功能和前庭功能，依据不同的 实验要求来收集基底膜组织和前庭组织的标本。通过基底膜及前庭组织铺 氧化应激水平和凋亡情况；通过Cx26和Cx30免疫荧光组织化学染色及 western Cx26和Cx30blot检测来观察两种蛋白在各组中的表达，从而研 究蛋氨酸是否在上述方面对顺铂引起的耳毒性和前庭毒性具有保护作用。 利用SPSSl3．0统计软件进行统计学分析，结果以均数4-标准差形式表示， 以P0．05为存在显著性差异的检验标准。 结果： 1一般观察结果：对照组小鼠正常生长，好动，耳廓反应灵敏；顺铂 组小鼠毛发无光泽，消瘦，不好动，耳廓反应不灵敏；蛋氨酸+顺铂组小 鼠正常生长，毛发有光泽，略消瘦，好动，耳廓反应较