异丙酚及DMSO上调人脐静态内皮细胞HO-1表达实验及研究.pdfVIP

中文摘要 临床麻醉中常用的静脉麻醉药异丙酚因为其酚结构而具有抗氧化应激作用，大量 的体外和体内研究已经证实了异丙酚的细胞和器官保护作用。先前的研究认为异丙酚 抗氧化应激作用的机制包括清除H202，减少脂酯过氧化物的形成，减少一氧化氮合酶 的形成及稳定线粒体膜。最近的研究提出异丙酚可能是通过上调血红素合酶10aeme 的保护作用源于其代谢产物的抗炎及抗氧化应激作用。然而，研究认为在正常状态下， 仅大剂量的异丙酚能够诱导HO．1表达上调，而临床相关剂量的异丙酚能否影响HO．1 表达变化尚不清楚。有丝分裂激酶蛋白家族(Mitogen．activedproteinkinases，MAPKs)， 核转录因子r．B(Nuclear factor-E2related factor 2,Nrf2)参与HO．1表达上调的信号转导。若临床相关剂量的异 丙酚能够诱导HO．1表达上调，那么这些信号分子很可能参与这一过程的信号传导。 因此，在正常及氧化应激状态下，临床相关剂量的异丙酚能否上调HO．1的表达以及 床相关剂量的异丙酚在正常或氧化应激状态下能够诱导HO．1表达上调，那么这种表 达上调是否参与或部分参与异丙酚的细胞保护作用(抗凋亡等)有待于细胞学实验来阐 明。在这个背景下，本研究第一部分拟探讨临床相关剂量的异丙酚对人脐静脉内皮细 UmbilicalVein 胞(Human Endothelial 中是否具有信号传递作用。 本研究第一部分中异丙酚的溶剂二甲基亚砜(Dimethyl 有机溶剂及水相溶。在临床，DMSO具有一定的治疗作用，已成功用于治疗肺腺癌， 胃肠疾病，慢性前列腺炎，皮肤疾病，还可以作为一种区域镇痛药物。然而，DMSO 治疗作用的潜在分子机制尚不清楚。在进行本研究第一部分实验时，意外发现大剂量 的药物治疗等保护作用可能与诱导HO．1表达上调有关，因此首先通过系统的实验来 具有激活或抑制作用，因此，与本研究第一部分的研究设计相同，第二部分实验拟探 MAPKs，NF．rd3和Nrf2在其中的信号转导作用。 实验第一部分的结果表明在正常状态下，临床相关剂量的异丙酚在HUVECs不能 诱导HO一1 mRNA表达上调，而在H202诱导的氧化应激状态下，异丙酚以剂量和时问 依赖的方式增NT 著作用。这些数据表明，ERKs信号通路参与了异丙酚所引起的HO．1上调的信号传导。 进一步研究证实在氧化应激状态下，异丙酚以剂量相关的方式增加ERKs磷酸化水平， 胞凋亡率。进一步而言，异丙酚的这种保护作用可部分被HO．1特异性阻断剂ZnPPIX 所阻断，因此表明HO．1是异丙酚在脐静脉内皮细胞保护作用的一个重要分子机制。 H202可增加NF—rd3 p65磷酸 p65磷酸化水平及核转移，而异丙酚单独应用时对NF．rd3 核转移水平较单独应用H202时显著上调，说明异丙酚在氧化应激状态下能够增加 号分子。 于HUVECs 却对此过程无明显作用。 在此基础上，本研究进一步发现0．8％的DMSO以时间依 响。这些数据充分表明JNKs激活参与了DMSO所介导HO一1表达上调的信号传导。 38％。由此，充分说明了Nrf2在DMSO上调HO一1中的作用。 调并且初步明确这两个过程中的潜在分子机制。鉴于内皮细胞系统在维持内环境稳态 方面起着重要的屏障作用，因此本研究的结果能够为麻醉药异丙酚在一些特殊临床情 况下应用提供新的理论基础，如发生脑缺血再灌注损伤时。本研究第二部分发现 达相关的研究提供了新的方法学参考，并为DMSO的临床靶向治疗提供了药理学基础 和深入研究的理论参考：但同时也强调了在与HO．1表达相关的研究中，当DMSO作 为目标研究药物溶剂时，应设立相关对照来调整浓度以排除非特异性干扰。 关键词：异丙酚；DMSO；HO．1；MAPKs；NF．KB；Nrf2 ABSTRACT is structure characterizeda and antioxidantthat Propofol byphenolic presents proper