《凋亡DNA Ladder提取试剂盒》.pdf

◆ 凋亡DNA Ladder快速提取试剂盒 ◆ 目录号1416 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 凋亡 DNA Ladder 快速提取试剂盒 目录号：1416 目录编号 包装单位 141601 20次 141602 50次  适用范围： 适用于快速提取凋亡DNA Ladder - 1 -  试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 20 次 50 次 裂解/结合液CB 室温 6 ml 15 ml 6 ml 15 ml 漂洗液WB 室温 第一次使用前按说明加指定量乙醇 洗脱缓冲液 EB 室温 15ml 15 ml 吸附柱AC 室温 20 个 50 个 收集管（2ml ） 室温 20 个 50 个 本试剂盒在室温储存12 个月不影响使用效果。 储存事项： 1. 裂解/结合液CB 低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶 解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时 盖紧盖子。 - 2 -  产品介绍： 细胞发生凋亡时，染色质DNA 在核小体之间发生断裂，最终形成200bp 整数倍 的DNA 片段，这些DNA 片段被提取后，经电泳及溴化乙锭染色后形成梯子状外观， 谓之DNA Ladder 。血液和组织培养细胞在裂解/结合液中裂解后，释放出来的DNA 片 段在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离 心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将DNA Ladder 片段从硅基质膜上洗脱。  产品特点： 1. 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 2. 本公司独有的裂解/结合液配方有效裂解细胞，使用本试剂盒不需要加入昂贵的蛋 白酶K 处理，大大降低了使用成本和加快了处理速度。 3. 节省时间，简捷，单个样品操作一般可在10 分钟内完成。 - 3 -  注意事项： 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机， 如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。 3. 裂解/结合液CB 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛 和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4. 一般2×106 培养细胞DNA 产量为10-20μg， 200μl 人全血典型产量为3-6μg。 5. 一般电泳检测时典型上样量为2-3μg 纯化的DNA ，如果凋亡率低，有可能只见到 基因组DNA ，而见不到DNA ladder ，可以试试加大上样量。 - 4 -  操作步骤： （实验前请先阅读注意事项） 提示： 第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加 入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入! 1. 取2×106 个细胞（悬浮细胞或者组织培养细胞重悬在200μl PBS 中）或者200μl 全血（大约