抗铬菌株的筛选鉴定及对麦田铬污染土壤修复效应的研究.pdf

摘要 随着现代工业、农业、交通运输业的迅速发展，土壤重金属污染越来越严重，土壤 中的重金属不仅影响农作物的生长，降低农作物的产量和品质，而且还会通过食物链危 机到人类的健康和生命。因此治理土壤重金属污染，已成为亟待解决的问题。而微生物 修复技术作为一种高效的生物修复技术，在治理重金属污染方面颇具有潜力。 首先，本研究通过驯化、筛选和分离技术，从污染的土壤中获得两株对铬具有较高 抗性的菌株A和B，它们对cr3+的最高抗性分别为450 mg／L和500mg／L，对Cr6+的最 高抗性分别为200 mg／L和220mg／L。菌株A是革兰氏阳性两端钝圆的短杆菌，有芽孢， 菌落乳白色、圆形或近似圆形、表面光滑湿润、边缘不整齐、质地软、稍有光泽，其生 理生化特性与芽孢杆菌属相似；经16S 状芽孢杆菌(Bacilluscereus)的相似性最高达99％，故将A鉴定为蜡状芽孢杆菌。菌 株B菌落疏松，呈棉絮状，最初呈白色，后变成灰褐色，2d内长满整个平板，在显微 镜下观察，孢子囊呈球形，有假根，孢子呈球形或近似球形，其形状、大小不等；经18S oryzae)类群的相似性达到了99％，故 rDNA序列分析表明菌株B与米根霉(Rhizopus 将B鉴定为米根霉。对抗铬菌株A和B的生长条件进行研究，结果表明菌株A和B的 mL(250 最适pH均为7；最适温度均为30℃；最佳装液量均为80一100mL摇瓶)；在 Cr3+初始浓度为100、200、300、400和500 mg／L时，菌株均能生长，但高浓度的Cr3+ 对菌株的生长有一定的抑制作用。对菌株A和B对Cr3+的生物吸附进行研究，结果表 明在培养时间一定时，随着Cr3+初始浓度的增加，菌株对cr3+的吸附率减少，而生物吸 附量则逐渐增大；在C，初始浓度一定时，随着培养时间的延长，菌体对C，的吸附率 呈现出先增加后减少的趋势，这与生物吸附量的变化趋势基本一致。 其次，采用水培试验方法分别研究了抗铬菌株Bacillus cereus和Rhizopusoryzae对 Cr3+胁迫下小麦幼苗生长、各部分镉积累量以及对小麦幼苗叶片几项生理生化指标的影 响。结果表明：C，+对小麦幼苗的生长有抑制作用，且随着处理液Cr3+浓度的增加，抑 制作用越明显。抗铬菌株菌悬液的加入，使小麦生长受到Cr3+胁迫的抑制作用有所缓解， 其中小麦叶长、根长及其干重都有不同程度的增加。叶和根系铬积累量随处理液cr3+浓 度的增加而增加，且根系铬积累量叶铬积累量。加入抗铬菌株菌悬液后，小麦幼苗叶 和根系铬积累量与未加菌组相比都有一定程度的降低。Bacillus cereus的加入使小麦幼 oryzae 在Cr”胁迫下，小麦幼苗叶片中MDA含量随处理液中cr3+浓度的增加而增加；根系活 力、叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量的含量均随处理液中Cr3+浓度的增加而降低；而 T 液后，小麦幼苗叶片MDA含量有所降低，根系活力和三种叶绿素含量都有一定程度的 升高，SOD和POD活性在一定程度上有所恢复。 再者，针对抗铬菌株对铬污染土壤的修复效果的研究，本试验采用温室盆栽的方法， 以小麦为供试植物，Bacillus oryzae为供试菌株，研究在外源铬污染 cereus和Rhizopus 条件下，这两菌株不同配比处理下对小麦生长及富集铬的影响，以确定菌株的最佳配比。 在最佳配比前提下，研究接入不同质量的混合菌剂对小麦生长及富集铬的影响，以确定 混合菌剂的最优添加量。在最