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几种糖醛酸及其寡糖的薄层层析分析

第33 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE ) 研究简报 第l2 期 2005 年l2 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry l750 ~ l752 几种糖醛酸及其寡糖的薄层层析分析 * 张真庆 于广利 赵 峡 李 倩 管华诗 (中国海洋大学 海洋药物与食品研究所,青岛266003 ) 摘 要 以葡萄糖醛酸(GlcA )、半乳糖醛酸(GalA )、甘露糖醛酸(ManA )、古罗糖醛酸(GulA )、半乳糖醛酸寡 糖( Oligo-GalA )、甘露糖醛酸寡糖(Oligo-ManA )、古罗糖醛酸寡糖(Oligo-GulA )和酶解褐藻胶寡糖(Oligo-u- Alg )为研究对象,探讨其薄层色谱(TLC )行为。结果表明,TLC 对不同糖醛酸寡糖有良好的分离和分析效果, 其中Oligo-GalA 与褐藻胶来源的寡糖!f 值不同,而同样来源于褐藻胶的Oligo-ManA 与Oligo-GulA !f 值相同; 首次发现酸解与酶解褐藻胶寡糖聚合度相同时!f 值不同。此外,4 种糖醛酸对不同的显色剂的显色灵敏度 也略有不同,其中硫酸铈显色剂的显色效果最灵敏。这些结果为快速有效分析酸性寡糖的纯度及其聚合度, 提供了简便有效的方法。 关键词 葡萄糖醛酸,半乳糖醛酸,甘露糖醛酸,古罗糖醛酸,寡糖 ! 引 言 糖醛酸广泛存在于自然界中,如海藻中的褐藻胶以及植物中的果胶等均含有大量不同结构的糖醛 酸,它们在食品、农业和医药等行业中已得到广泛的应用[l]。近年来,随着糖化学和糖生物学的发展, [2 ] [3 ] 糖醛酸及其寡糖的特殊结构及其生物活性,如抗凝血 、提高机体免疫力 等,被人们所重视。酸性寡 糖的分析方法目前主要有高效液相色谱(HPLC )、高效毛细管电泳(HPCE )、聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE )和高效离子色谱(HPIC )等,这些方法虽然有效,但由于设备昂贵,技术性较强,从而限制其在一 般实验室中的推广应用[4 ,5 ]。薄层层析(TLC )是一种简便有效的寡糖分析方法,已在中性糖及其衍生物 [6 ~ 8 ] [9 ] 中得到应用 。近年来,TLC 也逐渐被应用到酸性寡糖特别是糖醛酸寡糖的分析中 。 本实验以Glc A 、Gal A 以及Man A 、Gul A 和Oligo-u-Alg 为研究对象,讨论了这些糖醛酸及其寡糖 的TLC 色谱行为。针对不同糖醛酸寡糖的TLC 迁移率及在不同显色条件下的显色和灵敏度等问题进 行了比较分析,为酸性寡糖聚合度、纯度分析及不同糖醛酸之间的鉴别提供了一种简便有效的方法。 # 实验部分 # . ! 材料与方法 褐藻胶 (l% ,粘度60 mPa ·s )、聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛及酶解褐藻胶寡糖标准品;果胶(美国 Sigma 公司);葡萄糖醛酸标准品(美国Sigma 公司);半乳糖醛酸标准品(美国Fluka 公司);硫酸高铈 (天津市大茂化学试剂厂);钼酸胺(金堆城钼业公司);咔唑、蒽酮、苯胺、二苯胺、邻苯二甲酸均为分析 纯。硅胶板(G60 F254 20 cm X 20 cm ,德国Merck 公司);玻璃层析柱及填料(Sephadex Gl0 ,2 . 6 cm X 80 cm ,Bio-Gel P6 fine ,2 . 6 cm X 80 cm ,瑞典Pharmacia 公司)。 # . # 寡糖的制备 按文献[l0 ]方法将聚甘露糖醛酸和聚古罗糖醛酸分别水解得到甘露糖醛酸和古罗糖醛酸系列寡 糖,

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