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测试剂盒用于凝胶阻滞实验的新方法

遗! 传 !#$%’(()*+, +-. )# ($ ):% ’ %( ,))$ 技术与方法 改造地高辛标记 K8L 和检测试剂盒 用于凝胶阻滞实验的新方法 !, ! 祁小廷 ,柴小清 ,刘# 靖 ,柴团耀 (!$ 中国科学院研究生院生物系,北京!%%%’ ; $ 首都师范大学生命科学学院,北京!%%%() ) 摘# 要:凝胶阻滞实验(*+, -+./-0/.123 ),又称为电泳迁移率变动实验(4,+5.-2672-+.15 8291,1.: ;71. /;;/: ,4=? ),是 ( 研究蛋白和@A? 相互作用的一种技术。传统的 B 标记探针的凝胶阻滞实验,具有很高的灵敏度,然而也有接触 危险性的放射性同位素且不容易定量分析的缺点。最近利用非放射性标记的凝胶阻滞实验,已有很多成功的报 道,该方法快捷,安全,灵活,但非放射性标记探针的凝胶阻滞试剂盒的费用却很高。在论文中,我们提供了一种改 造地高辛标记@A? 和检测试剂盒用于凝胶阻滞实验的新方法。首先将双链@A? 探针末端引入!#C 粘性末端 ! 以便进行( D末端标记,然后利用价格比较便宜的地高辛标记@A? 和检测试剂盒(@EF G1*7 B-18+ @A? H/9+,13* /30 @+.+5.123 ./-.+- I1. ,C27+ )进行探针标记和凝胶阻滞信号检测。经过多次实验参数的摸索,最终得到了成功的 结果,为利用地高辛标记@A? 和检测试剂盒进行凝胶阻滞实验提供了成功的例子和方法。 关键词:凝胶阻滞实验;地高辛;探针 中图分类号: J)K# # # 文献标识码:?# # # 文章编号:%K( L ’))(%%M )%M L %)! L %K ! #$ %#’() *(+ ,%-! ./ %()0*/012 345 602’ 7+08# 3! 9:.#;012 :1) 3##0(1 -:+#+ =0 ! JE N1/2OP13*!, ,QG?E N1/2OJ13* ,HER S13* ,QG?E PT/3OU/2! (!/ $*01234*-3 56 )+575.8 ,921:;13* -+=*2+38 56 ?@+-** ’A1:*48 56 (A+*-A* ,)*+, +-. !%%%’ ,?@+-1 ; / ?577*.* 56 B+6* (A+*-A* ,?10+317 C52417 -+=*2+38 ,)*+, +-. !%%%() ,?@+-1 ) !.+: :M30;,9I0 ;9D34 33=210/70132:= D05::26 I7:?2 9II96 (BN-L ),:I 9 .I3?. 200 ?01 :43;2:?C 6:;G /1023:;CK8L :;2319=2:0;IA J6/:=96 ( , OC95334 K8L /1053I .I34 :; BN-L 913 I3;I:2:P3A Q0R3P31,:2 13C

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