巴氏小体的观察.pptVIP

巴氏小体的观察 实验目的 掌握鉴别巴氏小体的简易方法； 识别其形态特征及所在部位。 实验原理 基因有不可逆转的失活或丢失，受永久失活所调节的一个完整的染色体-----X－染色质，即巴氏小体。在雌性哺乳动物中，包括人类，女性口腔粘膜细胞中约30%-50%（男性0-2%）的细胞中，XX染色体其中一条就是失活的,表现为浓固缩状态。 染色体失活是在胚胎早期随机发生的，某些细胞中是父性X－染色体失活，有些是母性X－染色体失活。能产生同期相同X－染色体失活的细胞，使一个正常女性成为具有两种X－染色体组织类型的嵌合体。在某些时期的嵌合体细胞中，失活 X－染色质的数量始终比总的X－染色体数要少。可用这种方法检测出一些遗传病。 巴氏小体在细胞周期中比有活性的X－染色体复制晚。 Mary F.Lyon第一个发现巴氏小体是失活的X－染色质，所以在雌性哺乳动物中，一个X－染色体随机失活的想法叫Lyon假说。这种失活似乎是一种获得剂量补偿的方法。 X－染色质的形态表现为，结构致密浓染小体，轮廓清楚，常附着于核膜边缘或靠近内侧，其形状 有：微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形等。 实验用品 1.材料：女性口腔颊部粘膜细胞。 2.用品：显微镜，载玻片，盖玻片，吸水纸等。 3.药品：吉姆萨染液等。 实验方法 1.女性口腔颊部粘膜细胞的观察：从女性口腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，在原位刮取2～3次，可涂1～3片，干燥后，用Gimsa染色液染10分钟，勿使干燥，用水冲洗后晾干镜检。 2.毛发根部细胞的观察：拔取一根带有毛根的毛发，自基部截取2cm左右置载玻片上，在毛根部加一滴地衣红染液，片刻后再加一滴50％醋酸（或只加50％醋酸），低倍镜下观察，待毛根鞘软化后，拔去毛干，重新加一滴染液，加盖片，在酒精灯上轻微加热后，静置5分钟，加吸水纸，用手指轻压后镜检。 3.X－染色质的辨认：低倍镜下检出典型的可数细胞，其标准是： ⑴核质是网状或细颗粒状分布。 ⑵核膜清晰，核无缺损。 ⑶染色适度。 ⑷周围无杂菌。 　选定后的细胞，在高倍镜或油镜下进一步观察。X－染色质的形态表现为一结构致密浓染小体，轮廓清楚，常附着于核膜边缘或靠近内侧。 * * 女性细胞（箭头所指为巴氏小体） 男性细胞（没有巴氏小体） *