化妆品中三氯卡班的检测方法.docVIP

附件6： 化妆品中三氯卡班的检测方法 1 范围 本方法规定了采用液相色谱法测定化妆品中三氯卡班（CAS：101-20-2）含量的方法。 本方法适用于固体皂类、水类、乳液类等化妆品中三氯卡班含量的测定。 2 方法提要 样品在经过提取后，经高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法对三氯卡班的检出限为0.0005 μg，定量下限为0.001 (g；若取样品0.25 g，本方法对三氯卡班的检出浓度为4.5 (g/g，最低定量浓度为7.5 (g/g。 3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为一级实验用水。 3.1 三氯卡班，纯度＞99.0%。 3.2 丙酮，色谱纯。 3.3 甲醇，色谱纯。 3.4 三氯卡班标准储备液（ρ = 0.5 g/L）：精密称取三氯卡班0.025 g（精确到0.0001 g）于50 mL容量瓶中，加入甲醇（3.3）溶解并定容至50 mL，即得质量浓度为0.5 mg/mL的三氯卡班标准储备溶液。 3.5 系列浓度三氯卡班标准溶液：按照表1操作，分别精密量取一定体积的三氯卡班标准储备溶液（3.4）和标准溶液于10 mL容量瓶中，以甲醇（3.3）稀释并定容至刻度，得系列浓度三氯卡班的标准溶液。 表1 三氯卡班系列标准溶液的配制 序号 工作溶液 标准溶液的浓度 量取体积 定容体积 标准溶液终浓度 1 储备液 0.5 mg/mL 2.4 mL 10 mL 120 μg/mL 2 储备液 0.5 mg/mL 2 mL 10 mL 100 μg/mL 3 标准溶液 100 μg/mL 2 mL 10 mL 20 μg/mL 4 标准溶液 20 μg/mL 2.5 mL 10 mL 5 μg/mL 5 标准溶液 5 μg/mL 2 mL 10 mL 1 μg/mL 4 仪器 4.1高效液相色谱仪：具有紫外检测器。 4.2分析天平：感量0.0001g。 4.3超声波清洗器。 4.4微型涡旋振荡器。 5 测定步骤 5.1 样品处理 5.1.1 固体皂类化妆品 从中部切开样品，刮取断面样品（碎末状），准确称取0.25g，精确至0.001g，置于25 mL具塞比色管中，加入丙酮（3.2）5 mL，涡旋60s，分散均匀，超声（功率：400W）分散15 min，再加入甲醇（3.3）15 mL，超声（功率：400W）提取15 min，冷却到室温后，用甲醇（3.3）定容至25 mL刻度线，涡旋振荡摇匀，混液过0.45 (m滤膜，滤液可根据需要进行稀释，保存于2 mL棕色进样瓶中作为待测样液，备用。 5.1.2乳液和水类化妆品 准确称取试样0.25g，精确至0.001g，置于25 mL具塞比色管中，加入甲醇（3.3）20 mL，涡旋60s，分散均匀，超声（功率：400W）提取15 min，冷却到室温后，用甲醇（3.3）定容至25 mL刻度线，涡旋振荡摇匀，混液过0.45 (m滤膜，滤液可根据需要进行稀释，保存于2 mL棕色进样瓶中作为待测样液，备用。 5.2 色谱条件 色谱柱：C18 柱，250 mm×4.6mm i.d.，5 (m，或等效色谱柱； 流动相：甲醇 + 水（88 + 12）； 流速：1.0 mL/min； 检测波长：281 nm； 柱温：25 ℃； 进样量：20 (L。 5.3 测定 在5.2色谱条件下，取系列浓度的标准溶液（3.5）分别进样，进行色谱分析，以系列标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程。取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样20 μL，根据测定成分的峰面积，代入回归方程计算三氯卡班的质量浓度。按“6计算”，计算样品中三氯卡班的含量。 5.4 平行实验 按以上步骤操作，对同一样品独立进行平行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 6 计算 式中：( —— 化妆品中三氯卡班的质量分数，%； m —— 样品取样量，g； ( —— 测定成分的峰面积代入回归方程计算所得的三氯卡班质量浓度，(g/ mL； V —— 样品定容体积，mL； D —— 稀释倍数（不稀释则为1）。 7 回收率和精密度 多家实验室验证的平均回收率为91~106%，相对标准偏差小于3%。 8 色谱图 三氯卡班标准溶液（20 μg/mL）的高效液相色谱图 色谱峰：三氯卡班（TR = 7.3 min）