硝酸镥急性毒性的体液核磁共振氢谱研究.pdfVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXU E 　研究报告 第 11 期 2004 年 11 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1421～1425 硝酸镥急性毒性的体液核磁共振氢谱研究 吴惠丰　张晓宇　孙国英　吴亦洁　裴奉奎 李树蕾　聂毓秀 ( 中国科学院长春应用化学研究所 ,长春 130022) (吉林大学基础医学院 ,长春 130021) ( ) 摘 　要 　采用现代核磁共振技术 ,通过分析灌胃给药 0. 01 、0. 05 、0. 2 、2 、10 和 100 mg/ kg 剂量 Lu NO3 3 24 h (1 ) 内大鼠尿液及24 h 后大鼠血清的核磁共振氢谱 H NMR , 由体液中内源性代谢物浓度的变化研究了稀土化 合物在动物体内急性毒性。较高剂量组体液中的氨基酸、尿囊素、柠檬酸、氮氧三甲胺和肌酸酐等重要内源性 代谢物的核磁共振谱峰强度发生了明显的变化 ,说明动物体内的代谢物出现异常 :高剂量的稀土的引入可能 使动物肾脏和肝脏均受到损害 ,且受损程度随稀土剂量的增高而渐趋严重。 关键词 　稀土 ,体液 ,核磁共振 ,毒性 1 　引　　言 稀土化合物在农 、林、牧、医及电子等领域得到了广泛应用 ,稀土越来越多地进入生态环境和生物体 内。稀土化合物进入动物体内后,会对动物的器官、组织及细胞产生影响 ,将导致其体液容量、分布和电 解质浓度等方面的变化。因此 ,研究稀土生物效应是一个亟待解决的重要基础课题1 。NMR 是在分 子水平上对从动物体液到动物整体 , 以及对人体进行无损伤分析测定的重要方法。它具有简便、全面、 信息量大和非破坏性等优点 ,适用于对体液样品的监测和研究。稀土镧作为轻稀土 ,其毒性已经得到了 比较深入的研究2 ～4 。本实验采用现代核磁共振技术研究硝酸镥灌胃给药后对 Wistar 大鼠体液中代 谢产物的影响 ,为阐明稀土的急性毒性和稀土的进一步开发利用提供有意义的生化信息。 2 　实验部分 2 . 1 　动物实验 选用体重 300 ±20 g 成年雄性 Wistar 大白鼠 28 只 ,随机分为 7 组 :对照组和 6 组按给药剂量分成 的实验组 ,每组 4 只。Lu (NO3) 3 用生理盐水稀释。实验组的动物分别按 0. 01 、0. 05 、0. 2 、2 、10 和 100 mg Lu (NO3) 3/ kg体重灌胃给药 ,利用代谢笼集尿装置收集给药前 4 h ,给药后 0～4 h 、4～8 h 及 8～24 h 的大鼠尿液。24 h 后 ,将大鼠断颈处死取血 ,经过超滤和高速离心 ,分离得到血清样品。将新鲜尿液及 血清立即冷冻 ,贮存于 - 20 ℃左右环境中 ,直到进行核磁共振检测。 2 . 2 　核磁共振测试 体液样品放入 5 mm NMR 样品管中于 25 ℃进行测试。样品体积均为 0. 5 mL ,其中含 0. 1 mL - 6 1 D O ,用于锁场。以肌酸酐在化学位移 3. 06 ×10 的甲基氢峰作为内标。血清和尿样的 H NMR 谱图 2 均在 Bruker Av600 型仪器上测试。血清采用 CPM G 自旋回波序列结合预饱和方法采集信号, FID 采 样为 32 次 , 32 K 数据点 ,延迟时间为 6 s ,90°偏转角。尿液采用预饱和方法压制水峰 ,FID 采样 16 次 , 数据点是 64 K ,延迟时间