大鼠口腔黏膜上皮细胞诱导骨髓间充质干细胞向上皮细胞分化的体外的研究.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 研究论文大鼠口腔黏膜上皮细胞诱导骨髓间充质干细胞向上皮细胞 分化的体外研究 引言…………………………………………………………………8 第一部分原代培养大鼠口腔黏膜上皮细胞的研究 前言…………………………………………………………………10一日IJ舌…………………………………………………………………l 材料与方法…………………一……………………………………．10 结果…………………………………………………………………16 附图………………………………．………………………………．．18 附表……………………………………．……………………………20 讨论…………………………………………………………………．2l 小结…………………………………………………………………23 参考文献……………………………………………………………23 第二部分体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向上皮细胞分化的研究 前言…………………………………………………………………25刖舌…………………………………………………………………Z3 材料与方法…………………………………………………………25 结果…………………………………………………………………34 附图…………………………………………………………………．35 附表……………………………………………………………………37 讨论……………………………………………………．．．…………．38 小结………………………………………………：………………．．39 参考文献……………………………………………………………40 结论………………………………………………………………………．．42 综述骨髓间充质干细胞在阴道组织工程构建中的应用前景………．．43 致谢………………………………………………………………………51 个人简历…………………………………………………………………52 中文摘要 大鼠口腔黏膜上皮细胞诱导骨髓问充质干细胞向上皮细胞分化 的体外研究 摘 要 各种原因导致阴道缺失的患者需要进行阴道成形术，传统手术存在着 牺牲正常组织、遗留瘢痕、免疫排斥等问题。组织工程技术为阴道重建提 供理想的组织衬里，并且重建的阴道有理想的深度和宽度，弥补了传统手 术形成的人工阴道在形态和功能上的不足。种子细胞是进行组织工程化组 织构建的最为关键的要素，只有获得足够数量并保持特定生物学活性的种 子细胞，才能保证组织构建的成功。目前阴道组织工程的种子细胞大都采 用自体组织的同源细胞，但是存在着来源有限、细胞易老化、不能大规模 扩增以及细胞取材对机体造成新的创伤等不足，因此，骨髓间充质干细胞 marrow stem (Bone mesenchymal 其在阴道组织工程中应用的关键步骤。本研究尝试应用大鼠口腔黏膜上皮 细胞体外诱导骨髓间充质干细胞向上皮细胞诱导分化，为BMSCs作为种 子细胞应用于阴道组织工程奠定基础。 第一部分原代培养大鼠口腔黏膜上皮细胞的研究 目的：探讨大鼠口腔黏膜上皮细胞体外培养方法，以应用于诱导 BMSCs向上皮细胞分化的研究。 ．II和D．KSFM配制的0．6U／ml的Dispase II，记录每组上皮分离结 DispaseII和D．KSFM配制的1．2U／tnl的Dispase 果的评分及可获活细胞数，倒置相差显微镜下观察首次换液时细胞贴壁情 胞数，倒置显微镜观察细胞形态，扫描电镜观察细胞超微结构，免疫组化 及免疫荧光鉴定。 结果：PBS配制组与D．KSFM配制组相比，两者分离结果评分基本 中文摘要 学意义(e0．388)，首次换液时倒置显微镜下观察胰酶多次消化组贴壁细 壁细胞，3-6天细胞稍增多，7—8天