同时测定抗血吸虫感染新前药三个活性代谢物的LC-MS%2fMS方法开发、验证及其应用.pdfVIP

同时测定抗血吸虫感染新前药三个活性代谢物的LC-MS/MS 方法开发、验证及应用 摘 要 摘 要 目的DW 系列结构类似物是一类抗血吸虫感染新前药，其活性代谢物是青蒿 琥酯、双氢青蒿素和10-羟化吡喹酮。本课题拟开发和验证一种简便、快速、特异、 灵敏的液相色谱- 串联质谱方法同时测定大鼠血浆中青蒿琥酯、双氢青蒿素和 10- 羟化吡喹酮，并将应用于DW 系列结构类似物的药代动力学研究。 方法 采用岛津高效液相色谱系统和Agela Venusil C18 色谱柱（2.1 mm ×50 mm, 5 μm ），分离青蒿琥酯、双氢青蒿素、10-羟化吡喹酮与各自内标。以包含0.1% 甲 酸的10 mM 醋酸铵水溶液和乙腈为流动相对化合物进行线性梯度洗脱。运用API 4000 Qtrap 型三重四级杆质谱仪配备电喷雾离子源，以多反应监测模式进行正离子 检测，离子对分别为：青蒿琥酯m/z 402.2→m/z 267.3 、双氢青蒿素m/z 302.2→m/z 163.1、10-羟化吡喹酮m/z 329.2→m/z 219.4 。血浆样品处理采用一步蛋白沉淀法。 结果 三个化合物与各自内标在 6 分钟内实现基线分离。青蒿琥酯和 10-羟化 吡喹酮的线性范围为1.0-500 ng/mL ，双氢青蒿素的线性范围是5.0-2500 ng/mL 。 青蒿琥酯、双氢青蒿素和 10-羟化吡喹酮的准确度分别在 ±10.0% ， ±6.4%和 ±13.0% 以内。三个化合物的日内和日间精密度均小于 15% （除双氢青蒿素在最低 定量限时为15-20%之间）。 结论 本课题建立的同时测定青蒿琥酯、双氢青蒿素和 10-羟化吡喹酮的 LC-MS/MS 方法简便、快速、特异、灵敏。该方法已经成功应用于DW-3-15 体内 外药代动力学研究及其水解生成的三个化合物的定量测定。 关键词：液相色谱串联质谱，前药，青蒿琥酯，双氢青蒿素，10-羟化吡喹酮 作 者：何光照 指导教师：张洪建 教授 I 英文摘要 同时测定抗血吸虫感染新前药三个活性代谢物的LC-MS/MS 方法开发、验证及应用 Development, Validation and Application of a LC-MS/MS Method for Simultaneous Determination of Three Active Components Derived from Novel Prodrugs against Schistosome Infection Abstract Objective DW serial structure analogues are a kind of novel prodrugs against schistosome infection, whose active metabolites are artesunate, dihydroartemisinin and 10-hydropraziquantel. This subject will develop and validate a simple, rapid, specific and sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for simultaneous determination of artesunate (ARS), dihydroartemisinin (DHA), 10-hydroxypraziquantel (10-OHPZQ) in rat plasma, which will apply the