神农香菊(Dendranthema+indicum+var.aromaticum)组织培养及细胞悬浮培养体系的建立.pdfVIP

摘要 摘要 indicum 神农香菊(Dendranthema 资源，其花、叶及根均具有浓郁的香气，民间常以其花、叶阴干作香囊。其花、叶有清 热解毒的功效，是一种值得研究、开发、利用的药用植物新资源。本论文主要探讨了野 生植物神农香菊组织培养及细胞悬浮体系的建立，为神农香菊的原生质体分离、纯化以 及原生质体融合提供一定的理论基础。主要研究结果如下： 1、采用不同植物生长调节剂6-BA和NAA组合对神农香菊丛生芽诱导的实验表 0．1 明：神农香菊的嫩茎比较容易诱导出丛生芽，以茎段为外植体，在含有6-BAmg／L 和NAA0．1 mg／L的培养基上不定芽诱导率可达90％，且腋芽长势良好，平均每个外植 0．3 0．1 体可以产生8．7个不定芽；培养基为MS+6-BA mg／L心JAAmg／L时，较适宜神 农香菊丛生芽的继代培养；在6-BA和NAA的不同组合处理时，神农香菊均能生根， 但是在MS+NAA0．3 mg／L培养基中根最长，达5．8cm，数量最多且根最粗壮，在其它配 方中，根较细长柔弱，生根率较低。 2、以花器官不同组织部位为外植体，通过愈伤组织途径建立无菌培养体系，结果 表明：诱导花瓣愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA0．2 mg／L+6-BAl．5mg／L；诱导花托 愈伤组织的最佳培养基为MS+6一BA2．0mg／L+NAA0．2mg／L。采用不同发育时期的神农 香菊花托作为外植体进行组织培养，成功诱导了愈伤组织，花托处于显蕾初期，诱导分 化效果较好；处于同一时期的花托，诱导分化率随着直径的增大而降低，直径越小，形 成愈伤组织速度越快，诱导分化效果越好；诱导花梗愈伤组织的最佳培养基为 MS竹寸AA0．1 mg／L+6．BAl．0rag／L+2，4．D2．0mg／L；花药在MS+6．BA2．0mg／L+2，4． D1．0 mg／L+NAA0．2mg／L培养基上产生的不定芽数量最多。各种花器官外植体诱导愈伤组织 由易到难依次为花托花药．花梗花瓣。NAA可以增强其生根的效果，浓度以0-3 mg／I。为宜，移栽成活率达80％以上。 3、神农香菊不同外植体对愈伤组织诱导有很大的影响，其中无论是愈伤诱导率、 愈伤长势还是愈伤硬度，茎段的为最佳的外植体，诱导率虽然不是最高，但是其硬度最 低，且长势都好于其他外植体。在添加BA0．2mg／L和2，4．D1．0 mg／L的培养基上诱导 率达到100％。培养基为MS+NAA0．1 rag／L+6．BA0．5mg／L时，愈伤诱导成芽率最高， 达86．7％。 4、愈伤组织接种在液体培养基MS+BA0．2 0．5 mg／L+2，4．Dmg／L上，愈伤组织的 生长量最大，29愈伤接种18d后鲜重达到8．129。细胞悬浮培养过程中，悬浮培养物的 鲜重、pH和蔗糖浓度都发生了一定的变化，其生长曲线呈“S”型增长，存在生长延滞 期、对数生长期、停滞期；pH值的变化呈现一直下降趋势，但是可以一直保持在4．0以 上，可以维持细胞生长酸度；蔗糖浓度也呈现下降趋势，主要是因为在细胞生长过程中 摘要 要消耗大量的糖所致。 关键词神农香菊；组织培养；愈伤诱导；悬浮培养 Abstract Abstract