实验性兔肺动脉栓塞缺血再灌注肺血管内皮损伤以及热休克蛋白的保护作用.pdfVIP

中文摘要 实验性兔肺动脉栓塞缺血再灌注 肺血管内皮损伤以及热休克蛋白的保护作用 摘 要 目的：大量研究表明，再灌注可以触发一系列损伤反应， 引起相应脏器致命性损伤。人们发现肺移植、体外循环手术、 肺动脉血栓内膜剥除术、肺栓塞溶栓治疗等多种临床情况下 发生肺缺血后再灌注，肺损伤不但没有减轻反而加重，临床 lung inju职mu)。其特征性变化是肺毛细血管内皮细胞受 损，表现为肺血管通透性增加、肺血管阻力增加、肺动脉高 压等。目前，再灌注肺损伤的确切发生机制尚不十分清楚， 可能与炎性介质、氧自由基、肺泡上皮和肺血管内皮损伤等 shock 多种因素有关。热休克蛋(heat 遭受到热或其他损伤因素(如缺血、缺氧、重金属)作用后诱 导生成的一组蛋白质。在维持组织细胞的自身稳定和环境适 应性及抵御外界损伤等方面具有保护作用。研究发现，热休 克蛋白对心肌、肝脏、脑的缺血再灌注损伤有一定的保护作 用，但对肺的缺血再灌注损伤的保护作用尚有待于进一步研 究。本文旨在探讨兔肺动脉栓塞缺血再灌注模型中血管内皮 Wflebrand factor, (nitricoxide．NO)，血管假血友病因子(yon shock vWF)的变化和热休克蛋[与(heat 究肺损伤的可能机制及热休克蛋白的保护作用。 方法：选取健康新西兰白兔30只，体重2．5-3．5kg，雌 中文摘要 雄不拘。将Berman球囊漂浮导管的球囊置于左下肺动脉开 口处，充盈球囊，堵塞左下肺动脉，建立肺动脉栓塞模型。 然后球囊放气，复制肺动脉栓塞缺血再灌注模型。随机分为 肺动脉栓塞2h再灌注2h组(n=6)。各组动物分别于栓塞前、 取静脉血，抗凝、离心、取上清液，分装后放入-20℃保存， 分别采用放射免疫法测定血浆内皮素(ED的含量，酶联免疫 法测定一氧gg(NO)的含量。实验动物分别在相应时间点处 死，取少量左肺组织分别用4％多聚甲醛、4％戊二醛固定， 采用免疫组织化学方法测定热休克蛋白(HsP70)的表达及进 行组织病理分析观察组织超微结构变化。采用SPSS11．5版 统计软件处理数据。 假手术组外，肺栓塞1h组、肺栓塞2h组、肺栓塞2h再灌 高于栓塞前水平，有统计学意义。与假手术组相比，肺栓塞 增高，再灌注2h升高最为明显。与栓塞前及假手术组相比， 明显降低。(2)各组血浆中vwF的含量变化：除假手术组外， 肺栓塞1h组、肺栓塞2h组、肺栓塞2h再灌注lh组、肺栓 塞2h再灌注2h组血浆中的vWF含量均高于栓塞前水平， 有统计学意义(PO．05)。与假手术组相比，肺栓塞1h、2h 中文摘要 血浆中vWF的含量明显增多；再灌注lh后进一步增高，并 于再灌注2h达到高峰。(3)肺缺血再灌注的发生，免疫组织 化学染色显示兔肺组织中HSP70阳性细胞主要在肺泡上皮 细胞、部分支气管上皮细胞内大量表达。与假手术相比，肺 肺栓塞再灌注后透射电镜显示超微结构毛细血管内皮细胞 肿胀、空泡化、部分胞浆溶解，核染色质浓缩，线粒体部分 或大部分嵴和膜融合消失。 结论：(1)本实验通过介入方法使用Berman球囊漂浮导 管成功制作肺缺血再灌注动物模型，具有可控性强、重复性 好的优点，是基础研究的理想动物模型。(2)肺电镜超微结构 变化提示肺缺血再灌注过程中存在血管内皮损伤。(3)Er-1、 NO、vWF均可作为内皮细胞损伤的标志，本文结果显示内 皮细胞损伤及功能障碍参与肺缺血再灌注损伤。(4)HSP70在 肺栓塞缺血再灌注过程中表达增加，推测HSP70参与了肺缺 血再灌注损伤的保护。 关键词；缺血再灌注损伤；内皮素．1；一氧化氮；血管假 血友病因子；热休克蛋白70；肺；兔 英文摘要 vascularend