苯并硫氮杂(艹卓)类GSK3β非ATP竞争抑制剂设计、合成和构效关系研究.pdf

摘要 摘要 KillaSe Synthase3p，GSK3助是一个多功能的丝 糖原合成酶激酶3p(Glycogen 氨酸／苏氨酸蛋白激酶，参与体内多种重要的生理活动，是一个理想的疾病治疗 靶标。GSK3B的小分子抑制剂可望用于治疗多种复杂疾病，如糖尿病、早老性 痴呆症以及癌症等，正在成为一个新的研究热点。本课题研究目标是在前期虚拟 筛选的工作基础上，寻找非ATP竞争抑制GSK3p的活性先导化合物，并进一步 通过计算机辅助药物设计方法设计并合成相应的系列结构衍生物，通过体外酶抑 制活性筛选、酶动力学作用模式评价及构效关系分析，设计合成具有更高活性和 选择性的GSK 3p非ATP竞争型抑制剂，并初步明确此类抑制剂的构效关系，为 进一步研究治疗糖尿病、早老性痴呆症等疾病的新型药物奠定基础。 本文综述了GSK 3p抑制剂的研究进展。目前已报道的GSK3p小分子抑制 剂主要有三类：第一类是Mg+离子竞争抑制剂，如Li+；第二类是ATP竞争性 抑制剂，如马来酰亚胺类，这类抑制剂活性一般较强，但选择性较差，毒副作用 TDZD)类，这类抑制剂最大的优势就在于具有较高的选择性，其中一个化合物 NP 12已进入了临床研究，显示出了良好的应用前景。 论文阐述了本课题非ATP竞争型GSK 3p抑制剂先导化合物的获得和优化过 程，以及活性筛选结果。以GSK3p晶体(PDB code：1UV5)底物结合区的关键氨 3．0．5 程序对Maybridge数据库中5万个分子进行虚拟筛选，得到数十个命中结构，其 中打分排名前2，3，4位的化合物具有共同的结构母核苯并嗍【l，4]硫氮杂覃-4．(5肋 酮。通过对该结构母核进行结构修饰，设计合成了6个衍生物；并经体外酶活抑 uM)的GSK3D抑制剂5．苄基．2．(2．呋 制测试，从中发现了一个中等活性(IC50=47 喃基)．2，3一二氢．苯并[b]【1，4】硫氮杂覃．4(5H)．酮(CVbc)，经酶促反应动力学实验确 证为非ATP竞争抑制剂，以其作为先导化合物供进一步结构优化和改造。 作者根据生物电子等排原理和基团反转等经典药物结构修饰方法对先导化 合物CYbc进行了多方面结构改造。设计了三条合成路线共合成了29个结构衍 生物，经体外酶活测试，与先导化合物CYbc活性相当或有所提高的目标物有12 个，经酶促反应动力学实验再次证实，这些新结构衍生物对GSK3p的抑制仍保 持为非ATP竞争作用；初步构效关系表明，用苯环替换先导物CYbc的2位呋 核七元环内酰胺基团进行基团反转得到的化合物2-苯基．3，4-二氢．苯并闳【1，4】硫 氮杂覃．5(2／-／)．酮(HZkca)均保持了较好活性，为进一步的结构衍生提供了良好的 摘要 空间。进一步以上述2．苯基一2，3．二氢．苯并咖[1，4】硫氮杂革．4(5／0．酮和3,4．二氢． 苯并阅【1，4】硫氮杂覃．5(2／-／)．酮两种母核结构为先导，进行了多种取代基团的变 换，再设计合成了43个目标化合物，经体外活性测试，活性与先导物HZkea相 当的化合物有7个，活性提高的化合物有10个，酶动力学实验也再次证实此类 新结构活性化合物的作用模式仍然保持为非ATP竞争抑制。根据这些活性数据 总结了更进一步的构效关系。 与GSK 3p进行了分子对接研究，表明化合物的苯环与与GSK3p底物作用区的 Pile 96形成氢键。 93有M堆积作用，羰基与Arg 此外，作者也尝试采用手性酸对化合物HZkcw进行化学拆分，希望得到光 学异构体后经重氮化和置换反应获得活性化合物HZkcj的光学纯异构体，但拆分 未获成功。 本课题共设计合成了53个中间体及78个目标化合物，经Scifinde