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磺脲类药物和替米沙坦对MIN6 细胞的影响
摘要
磺脲类药物属于胰岛素促泌剂,它们在临床上广泛用于治疗2 型
糖尿病。但是,随着治疗时间延长,临床上出现药物继发性失效现象。
有研究显示,某些胰岛素促泌剂(如格列本脲)可诱导胰岛β细胞发
生氧化应激,产生 ROS,进而诱导细胞凋亡。但是,目前尚不明了
这些促泌剂通过何种机制损害β细胞,也不清楚是否所有的胰岛素促
泌剂都有类似的作用。而ARB 有保护β细胞功能的作用。本研究选
择甲苯磺丁脲、格列吡嗪、格列奇特药物和替米沙坦分别从细胞活力、
细胞内 ROS 生成和细胞凋亡三个方面探讨胰岛素促泌剂对β细胞的
影响及其机制。
一.甲苯磺丁脲、格列吡嗪、格列奇特对MIN6 细胞的影响
目的:研究不同磺脲类药物对胰岛分泌细胞的影响及机制。
方法:不同浓度甲苯磺丁脲、格列吡嗪和格列奇特干预MIN6 细
胞一定时间后,MTT 法检测细胞活力变化,运用ROS 捕获剂双氢
溴乙啶(HE)、双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)和双氢罗
丹明123 (DHR123)孵育细胞,同过荧光显微镜观察细胞内荧光、
流式细胞仪检测 MIN6 细胞的 MFI 而测得细胞内 ROS 水平。用
Annexin-vFITC 和PI 双标
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